[发明专利]一种Tirzepatide的纯化方法

说明书

本发明是一种Tirzepatide的纯化方法，属于药物化学技术领域。该纯化方法将Tirzepatide粗肽溶于纯化水中，用氨水调pH8.0至完全溶解，获得粗肽溶液后，通过二步纯化获得Tirzepatide。该纯化方法制备获得的Tirzepatide纯度高，收率高，且操作简单，有利于实现Tirzepatide的规模化制备。本发明方法的收率为70%左右，获得的Tirzepatide纯度99.0%以上，单杂0.15%以下。

技术领域

本发明属于药物化学技术领域，特别涉及一种Tirzepatide的纯化方法。

背景技术

糖尿病是给世界人民带来沉重经济负担的疾病之一。目前糖尿病患者数量增长速度很快，根据世界卫生组织数据，2000年全球糖尿病患者为1.71亿人，而2030年这个数字将变成3.66亿。中国是世界第一糖尿病大国，当前我国糖尿病人群约有9240万，处于糖尿病前期的人群有1.48亿。GLP-1作为肠促胰岛素，既可单方开发，也可与胰岛素做成复方，实现更平稳地降糖，因此复方GLP-1类似物胰岛素制剂将会是短效GLP-1类似物产品的主要卖点之一。不仅如此，GLP-1类似物还具有很好的减肥作用，诺和诺德的减肥针已经获批，在人们强烈的减肥欲望与疗效不佳的现有减肥药形成大矛盾的今天，开发GLP-1类的减肥药也是一个不二的选择。

Tirzepatide是一种大分子多肽类药物，具有胃抑制多肽（GIP）受体和胰高血糖素样肽-1（GLP-1）双重受体激动剂的功效。GIP和GLP-1均为肠道分泌的激素，能够促进胰岛素分泌。在2019年第79届美国糖尿病协会（ADA）大会上公布的一系列数据表明：在2型糖尿病患者中，Tirzepatide改善了β细胞功能和胰岛素敏感性标志物、显著降低血糖水平、显著降低体重、改善胃肠道副作用，同时还改善了非酒精性脂肪性肝炎（NASH）标志物。

Tirzepatide具有以下的结构：

Tyr1-Aib-Glu-Gly-Thr5-Phe-Thr-Ser-Asp-Tyr10-Ser-Ile-Aib-Leu-Asp15-Lys-Ile-Ala-Gln-Lys20(AEEA-AEEA-γGlu-Eicosanedioic acid)-Ala-Phe-Val-Gln-Trp25-Leu-Ile-Ala-Gly-Gly30-Pro-Ser-Ser-Gly-Ala35-Pro-Pro-Pro-Ser-NH2

由于Tirzepatide的肽链较长、侧链含有较长的修饰、肽序中含有如Ser等合成过程中易异构化的氨基酸而导致粗肽中具有异构体杂质，所以在合成中产生的杂质较多，需要对Tirzepatide粗肽进行进一步的纯化。然而，现有技术中Tirzepatide纯化方法的收率较低，导致Tirzepatide的纯化成为Tirzepatide制备工艺中的难点、Tirzepatide产业化的瓶颈之一。所以，需要探索一种Tirzepatide的纯化方法，以提高Tirzepatide的收率。

发明内容

有鉴于此，本发明的发明目的在于提供一种Tirzepatide的纯化方法。本发明提供的Tirzepatide的纯化方法操作简单，提高了Tirzepatide的收率，更有利于Tirzepatide的工业化大生产。

为了实现本发明的发明目的，本发明采用如下的技术方案：

本发明提供了一种Tirzepatide的纯化方法，其包括：

步骤1：取Tirzepatide粗肽溶于纯化水中，用用氨水调pH8.0至完全溶解，，溶液用0.45μm混合微孔滤膜过滤，获得粗肽溶液。

步骤2：取所述粗肽溶液，经八烷基硅烷键合硅胶色谱柱进行第一次纯化，以A1溶液与B溶液的混合溶液进行梯度洗脱，收集洗脱组分，得第一次纯化物；

步骤3：取所述第一次纯化物，经八烷基硅烷键合硅胶色谱柱进行第二次纯化，以A2溶液与B溶液的混合溶液进行梯度洗脱，收集洗脱组分,得第二次纯化物；