[发明专利]一种金黄色葡萄球菌检测方法有效

专利信息
申请号: 202011542642.6 申请日: 2020-12-23
公开(公告)号: CN112763558B 公开(公告)日: 2022-06-10
发明(设计)人: 万海方;傅云斌;陈远辉 申请(专利权)人: 杭州市红十字会医院
主分类号: G01N27/30 分类号: G01N27/30;G01N27/48
代理公司: 杭州天麟知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 33374 代理人: 占宇
地址: 310000 浙江*** 国省代码: 浙江;33
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摘要:
搜索关键词: 一种 金黄色 葡萄球菌 检测 方法
【权利要求书】:

1.一种金黄色葡萄球菌检测方法,其特征在于,包括以下步骤:

S1:配置不同浓度的金黄色葡萄球菌悬浮液,检测每个浓度的金黄色葡萄球菌悬浮液对应的特征值Y,将这些值进行拟合得到浓度计算公式:Y=0.13×LgX-0.01,X为金黄色葡萄球菌悬浮液的浓度;

S2:取待测金黄色葡萄球菌悬浮液,检测其对应的特征值Y,根据浓度计算公式:Y=0.13×LgX-0.01,计算出待测金黄色葡萄球菌悬浮液的浓度;

所述检测某个浓度的金黄色葡萄球菌悬浮液对应的特征值Y的方法包括以下步骤:

M1:制备培育了金黄色葡萄球菌抗原的工作电极,将未培育金黄色葡萄球菌抗原的工作电极标记为第一工作电极,将培育了金黄色葡萄球菌抗原的工作电极标记为第二工作电极,将第一工作电极、对电极、参比电极组成第一电化学传感器阵列,将第二工作电极、对电极、参比电极组成第二电化学传感器阵列;

M2:采用同样方法对该浓度的金黄色葡萄球菌悬浮液进行m次检测,每次检测的检测步骤如下:

在未使用过的第一工作电极、未使用过的第二工作电极上都滴加2.5ul该浓度的金黄色葡萄球菌悬浮液,静置25分钟后,将第一电化学传感器阵列、第二电化学传感器阵列分别插入两个同样的缓冲溶液内并采用循环伏安法从小到大依次切换n种不同的扫描速率进行检测,得到n个还原峰电流差值ΔIpw1、ΔIpw2…ΔIpwn,ΔIpwn=Ip1wn-Ip2wn,ΔIpwn为第w次检测中第n种扫描速率下的还原峰电流差值,Ip1wn为第w次检测中第n种扫描速率下第一电化学传感器阵列对应的还原峰电流值,Ip2wn为第w次检测中第n种扫描速率下第二电化学传感器阵列对应的还原峰电流值,1≤w≤m;

M3:根据m次检测的检测数据构建出特征矩阵D,

M4:将特征矩阵D的每行数据进行二次样条插值,得到m个与每行数据对应的曲线x(t),对m个曲线x(t)进行同样的数据处理,得到m个特征值F,对每个曲线x(t)进行的数据处理包括以下步骤:将x(t)带入非线性定向饱和共振模型中,饱和势函数检测信号载入分量ing(t)=cos(kt+η)+x(t),

其中,t为插值变量,k为实参数,η为实参数,nois(t)为功率谱密度函数不平坦的有色噪声,P为实参数,Q为实参数,

绘制非线性定向饱和共振模型的共振曲线,取共振曲线中的最大峰值作为共振特征值E,

通过公式计算得到特征值F;

M5:将m个特征值F取平均,得到的平均值即为特征值Y的值。

2.根据权利要求1所述的一种金黄色葡萄球菌检测方法,其特征在于,所述步骤M3还包括以下步骤:

计算稳定系数λij

如果λij≤0.8,则判断数据异常,跳转至步骤M2重新检测,

如果λij>0.8,则判断数据正常,执行步骤M4。

3.根据权利要求1所述的一种金黄色葡萄球菌检测方法,其特征在于,所述n种不同的扫描速率包括50mV/s、100mV/s、200mV/s、300mV/s、400mV/s、500mV/s。

4.根据权利要求1所述的一种金黄色葡萄球菌检测方法,其特征在于,所述缓冲溶液的配置方法如下:将0.5mmol/1的H2O2溶液与1.0mol/l的Thi/HaC-NaAc溶液按体积比1∶2混合均匀。

5.根据权利要求1所述的一种金黄色葡萄球菌检测方法,其特征在于,所述工作电极为铜膜电极,所述对电极为Pt电极,所述参比电极为Ag/AgC1电极。

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