[发明专利]一种快速分离灵芝醇提物中三萜和甾醇的方法

说明书

本发明涉及天然药物提取分离领域，公开了一种快速分离灵芝醇提物中三萜和甾醇的方法。该方法采用聚酰胺树脂装柱，用特定比例的溶剂进行洗脱，得到灵芝醇提物中三萜和甾醇洗脱液，将洗脱液浓缩干燥即得灵芝三萜和灵芝甾醇。灵芝甾醇与灵芝三萜结构相似，极性相似，均易溶于有机溶剂，分离难度较大，传统制备工艺繁琐、生产成本高。针对现有技术的不足，本发明提供了一种快速分离灵芝三萜和甾醇成分的方法，操作十分简便，分离准确度高，重现性好，且安全性高，成本较低，适合工业化生产。

技术领域

本发明涉及天然药物提取分离领域，具体涉及一种快速分离灵芝醇提物中三萜和甾醇的方法。

背景技术

灵芝(Ganoderma lucidum)是一种名贵的药用真菌，属于担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌赤芝和紫芝的总称，始载于《神农本草经》，具有补中益气、滋阴强壮、扶正固本、延年益寿等功效。灵芝的成分丰富，包括灵芝多糖、三萜及甾醇成分、核苷、蛋白质和微量元素等，其中灵芝三萜和甾醇成分以及灵芝多糖是最主要的活性物质。现代医药学研究灵芝及其提取物发现，灵芝三萜类化合物具有抗肿瘤、保肝、降血糖、抑制血管紧张素、抗氧化等功效；灵芝甾醇具有增强人体抵抗疾病的能力，降低血液中的胆固醇浓度，预防前列腺疾病等功效。

目前国内外对灵芝多糖和灵芝三萜的研究比较多，灵芝多糖易溶于水、酸、碱、盐等溶液而难溶于醇、醚、丙酮等有机溶剂，灵芝三萜难溶于水而易溶于有机溶剂，因此灵芝多糖和灵芝三萜较容易分离，其分离工艺比较简单也比较成熟。但灵芝甾醇与灵芝三萜结构相似，极性相似，均易溶于有机溶剂，分离难度较大。灵芝醇提物中主要成分为灵芝三萜和灵芝甾醇，目前对灵芝甾醇类物质的研究不够深入，尤其是对灵芝甾醇类物质分离研究报道非常少，一是因为灵芝甾醇含量相对较低，二是传统制备工艺繁琐、生产成本高，因此，亟需一种简便的方法可以快速分离灵芝三萜和灵芝甾醇。

灵芝三萜和甾醇的提取分离方法主要是有机溶剂浸提法、大孔树脂提取法以及超声波处理法。中国专利CN1629179A采用乙醇回流提取再碱化得到灵芝甾醇类化合物，中国专利CN1560072通过采用超临界提取分离得到灵芝三萜和灵芝多糖成分，中国专利CN101530436A用超声波、酶提等技术提取分离得到灵芝三萜和灵芝多糖成分。目前暂无同时提取分离得到灵芝三萜和灵芝甾醇成分的相关专利，有文献报道采用高压超临界CO₂提取灵芝三萜和甾醇，但所得提取物为混合物，未能将灵芝三萜和灵芝甾醇分离，且高压超临界CO2提取方法所需设备投入较大、操作难度和生产成本也较高。

发明内容

本发明的目的在于，针对现有技术对灵芝三萜和甾醇分离难度较大、工艺繁琐、生产成本高等不足，提供了一种简单快速的方法，可同时提取分离灵芝醇提物中三萜和甾醇成分。

为了解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

一种快速分离灵芝醇提物中三萜和甾醇的方法，采用聚酰胺树脂装柱，以有机溶剂的水溶液对灵芝醇提物进行洗脱，即可使三萜和甾醇分离。

优选的，所述有机溶剂包括乙醇、甲醇、丙酮中的一种或多种。

优选的，所述聚酰胺树脂装柱包括如下步骤：

A、预浸泡：将所述聚酰胺树脂原料用所述有机溶剂进行浸泡，超声或搅拌除去气泡，浸泡时间为10h以上；

B、装柱：将步骤A浸泡后的所述聚酰胺树脂装柱，用水洗柱至无味，获得聚酰胺树脂柱；

C、上样：取所述灵芝醇提物和步骤A浸泡后的所述聚酰胺树脂按质量比1:1～2拌样，之后蒸干，填装到所述聚酰胺树脂柱中完成上样，上样量不超过2.5g/100ml。