[发明专利]ST2蛋白检测试剂盒和检测方法

说明书

本发明公开一种ST2蛋白检测试剂盒和检测方法，其中，ST2蛋白检测试剂盒包括第一试剂、第二试剂和第三试剂；所述第一试剂包括磁微粒偶联的ST2蛋白抗体；所述第二试剂包括酶标记的ST2蛋白抗体；所述第三试剂包括裸ST2蛋白抗体；所述裸ST2蛋白抗体的浓度大于所述酶标记的ST2蛋白抗体的浓度。本发明ST2蛋白检测试剂盒提高了检测的准确性。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及ST2蛋白检测试剂盒和检测方法。

背景技术

可溶性生长刺激表达基因2蛋白(souble growth STimμlation expressed gene2，sST2或ST2)是白细胞介素1受体/Toll样受体超家族的成员，在免疫和炎症反应中起到关键作用。ST2由328个氨基酸组成，包括由9个氨基酸组成的独特C端序列，分子量为36993Da。ST2主要在心肌细胞、心脏成纤维细胞、肥大细胞以及辅助性T细胞(Th)类淋巴细胞的表面进行表达，表达后可以分泌到细胞外。心肌细胞和成纤维细胞受到机械牵张时可以表达ST2L和ST2，ST2与白介素33(IL-33)结合，阻断IL-33/ST2L信号传导，从而抑制核因子-κB和丝裂原活化蛋白激酶的激活，进而减弱心肌保护作用、促进心脏损伤及重塑。ST2也是重要的心室重构和心脏纤维化的标志物，ST2含量显著性地升高可以反映全身组织尤其心肌组织纤维化过程的加剧。测定ST2蛋白浓度可用于辅助判断和预后评价多种心血管疾病，例如急性心力衰竭、慢性心力衰竭、急性冠状动脉综合征等。

目前，市场用于检测ST2蛋白的方法主要是化学发光法、免疫层析法、酶联免疫吸附测定法、胶乳增强免疫比浊法等。免疫层析法灵敏度较低，易受杂散光干扰；市面上主流的Critical Diagnostics公司的酶联免疫法试剂盒，操作流程繁琐，检测时间长，产生较多样本污染废液；胶乳增强免疫比浊法、化学发光法的成本较高、检测时间长，且需要配套价格昂贵的全自动分析系统进行检测。

上述内容仅用于辅助理解发明的技术方案，并不代表承认上述内容是现有技术。

发明内容

本发明的主要目的是提出一种ST2蛋白检测试剂盒和检测方法，旨在提高检测ST2蛋白的准确性。

为实现上述目的，第一方面，本发明提出一种ST2蛋白检测试剂盒，包括：

第一试剂，所述第一试剂包括磁微粒偶联的ST2蛋白抗体；

第二试剂，所述第二试剂包括酶标记的ST2蛋白抗体；以及

第三试剂，所述第三试剂包括裸ST2蛋白抗体；

其中，所述裸ST2蛋白抗体的浓度大于所述酶标记的ST2蛋白抗体的浓度。

可选地，所述裸ST2蛋白抗体的浓度为大于或等于1.5ng/ml，且小于或等于2.5ng/ml。

可选地，所述磁微粒被甲苯磺酰基化。

可选地，所述磁微粒的直径为大于或等于1.0μm，且小于或等于3.0μm。

可选地，所述磁微粒的浓度为大于或等于0.05mg/ml，且小于或等于0.4mg/ml。

第二方面，本发明提出一种ST2蛋白检测方法，包括以下步骤:

(1)依次混合待测样品、第一试剂、第二试剂和第三试剂，依次混合校准品、第一试剂、第二试剂和第三试剂，分别孵育并洗涤后加入底物发光液；

(2)检测所述底物发光液的相对发光强度，通过检测得到的相对发光强度，计算ST2蛋白的浓度；

其中，所述第一试剂包括磁微粒偶联的ST2蛋白抗体，所述第二试剂包括酶标记的ST2蛋白抗体，所述第三试剂包括裸ST2蛋白抗体，所述裸ST2蛋白抗体的浓度大于所述酶标记的ST2蛋白抗体的浓度。