[发明专利]一种基于MnO2

权利要求书

1.一种基于MnO₂复合酶模拟物的铜离子比色检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

S101：配置10²-10⁷nmol/L的Cu²⁺及L-Cys溶液

S102：合成磁珠和MB/Au/PANI/MnO₂复合材料

S103：配制NaAC-HAC缓冲液

S104：配制TMB溶液

S105：条件优化

S106：对铜离子进行比色检测。

2.根据权利要求1所述的一种基于MnO₂复合酶模拟物的铜离子比色检测方法，其特征在于，步骤S101中，称取CuSO₄·5H₂O，配置成硫酸铜溶液，随后稀释若干次，得100nmol/L Cu²⁺，所配溶液置于4℃保存。

3.根据权利要求1所述的一种基于MnO₂复合酶模拟物的铜离子比色检测方法，其特征在于，步骤S101中，称取L-Cys，配成10mL、400μmol/L溶液，所配溶液置于4℃保存。

4.根据权利要求1所述的一种基于MnO₂复合酶模拟物的铜离子比色检测方法，其特征在于，步骤S102中，磁珠的合成步骤包括：

HCl溶液中通氮气20-25min，称取FeCl₂·4H₂O和FeCl₃·6H₂O置于圆底烧瓶中，加入以上通氮气的HCl溶液，充分搅拌至完全溶解，混合液中通氮气除氧20-25min，重复通入数次，然后快速加入NaOH溶液，在氮气保护下剧烈搅拌2-2.1h，用二次水冲洗数次至中性，一部分置于4℃保存待用，另一部分自然晾干待用。

5.根据权利要求1所述的一种基于MnO₂复合酶模拟物的铜离子比色检测方法，其特征在于，步骤S102中，MB/Au/PANI/MnO₂复合材料的合成步骤包括：

水洗后的MB加入PVP溶液中，振荡摇匀，加入氯金酸，超声5-6min，备用，记为溶液A；

苯胺与HCL溶液混合搅拌均匀，记为溶液B；

将溶液A与溶液B混合，同时加入过硫酸铵，振匀，静置2-2.1h，磁性分离、清洗、烘干，再分散于水中，超声均匀，加入KMnO₄溶液，振匀，磁性分离、清洗，即得所需MB/Au/PANI/MnO₂复合材料。

6.根据权利要求1所述的一种基于MnO₂复合酶模拟物的铜离子比色检测方法，其特征在于，步骤S103中，NaAC-HAC缓冲液的配制步骤包括：

称取乙酸钠，稀释定容至100mL，用乙酸调pH至4，得NaAC-HAC缓冲液。

7.根据权利要求1所述的一种基于MnO₂复合酶模拟物的铜离子比色检测方法，其特征在于，步骤S104中，TMB溶液要现配现用，TMB溶液的制备步骤包括：

A液：TMB溶于DMSO，搅拌均匀，备用；

B液：柠檬酸加入NaHPO₄搅拌均匀，定容至100mL；

随后将制备好的A液全部加入10mL B液中，超声均匀，得所需TMB溶液。