[发明专利]紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱的构建方法及应用

说明书

本发明提供一种紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱的构建方法及应用，该方法包括供试品溶液的制备、相应对照品溶液以及相应对照药材溶液的制备、构建参照指纹图谱和供试品溶液指纹图谱，确定紫龙金片所含不同药材的特征峰，并进行了特征图谱方法学的验证。本发明通过大量实验筛选出最佳的流动相组成、梯度洗脱程序、色谱柱、检测波长、检测柱温以及检测流速等分析条件。经特征图谱方法学的验证，本发明提供的方法，可以全面、客观以及准确地检测和评价紫龙金片的药品质量，可以从源头上保证紫龙金片的安全性和有效性，保证临床疗效。

技术领域

本发明涉及中药鉴别技术领域，尤其是涉及一种紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱的构建方法及应用。

背景技术

紫龙金片是天津中新药业集团股份有限公司隆顺榕制药厂生产的独家品种，质量标准收载于《中国药典》2010年版一部。药典标准中仅有三项鉴别及一项含量测定，无法涵盖紫龙金片中八味药材中众多成分的检测。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一种紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，能够全面、客观以及准确地检测和评价紫龙金片的药品质量。

本发明的目的之二在于本发明提供的方法在评价紫龙金片的药品质量方面的应用。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供了一种紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱的构建方法，包括以下步骤：

a)提供供试品溶液和参照物溶液；

参照物包括丹酚酸B和丹参酮ⅡA对照品，以及丹参、半枝莲和蛇莓对照药材；

b)采用高效液相色谱法对供试品溶液和参照物溶液进行分析，构建高效液相色谱指纹图谱；

其中，高效液相色谱条件包括：

色谱柱：Waters Symmetry C₁₈色谱柱；

柱温为20～30℃；

流动相：流动相A为0.05％～0.15％磷酸和85％～95％的乙腈溶液，流动相B为0.05％～0.15％的磷酸溶液；

梯度洗脱程序为，按体积百分数计：

0～7min，A：12→17％、B：88→83％；

7～12min，A：17％、B：83％；

12～24min，A：17→22％、B：83→78％；

24～33min，A：22→27％、B：78→73％；

33～44min，A：27→32％、B：73→68％；

44～51min，A：32→77％、B：68→23％；

51～75min，A：77→92％、B：23→8％；

流速为0.75～1.0ml/min；

检测波长为230～320nm。

优选地，所述紫龙金片的高效液相色谱指纹图谱中包括如下7个共有峰：

共有峰中峰1来源于蛇莓；峰2+峰3来源于半枝莲；峰4为丹酚酸B峰；峰5+峰6来源于丹参；峰7为丹参酮ⅡA峰。

优选地，所述各共有峰的相对保留时间变化范围为±5％。

优选地，在所述参照物的高效液相色谱指纹图谱中，以丹酚酸B为参照峰S，计算紫龙金片的各特征峰与S峰的相对保留时间，所述相对保留时间在规定值的±5％之内；