[发明专利]氟环唑和多菌灵的超高效液相色谱串联质谱检测方法

说明书

本发明公开了一种柑橘全果和果肉中氟环唑和/或多菌灵残留量的超高效液相色谱串联质谱检测方法，该方法包括如下步骤：1)标准工作液及基质标准溶液的配制；2)样品工作液的配制：3)超高效液相色谱串联质谱法检测分析；4)检测条件形成。本发明将QuEChERS法与超高效液相色谱‑串联质谱联用仪结合，能够对柑橘全果和果肉中的氟环唑和多菌灵进行高效而准确的检测，使得成分检测分析更快速，节省时间，且检测灵敏度高，检测数据精确，节约成本，提高检测效率。

技术领域

本发明涉及柑橘中的氟环唑和多菌灵的检测，尤其是指用超高效液相色谱串接质谱联用仪对柑橘中氟环唑和多菌灵进行检测的方法，该方法具有简便快捷、灵敏度高、重现性好等优点。

背景技术

氟环唑是巴斯夫公司研发的低毒、长效、内吸型三唑类杀菌剂，能被植物的茎、叶吸收，并向上、向外传导，可有效抑制病菌麦角甾醇的合成，阻碍病菌细胞壁的形成；可快速被靶标植株吸收并传导至相应的感病部位，使病害浸染立刻停止；可以防治多种作物真菌性病害，对一系列禾谷类作物病害如眼纹病、白粉病、立枯病等具有良好的预防和防治效果，广泛应用于香蕉、水稻、柑橘等作物上。

多菌灵属苯并咪唑类杀菌剂，高效低毒，具有治疗和保护作用，对子囊菌纲的某些病原菌和半知菌类中的大多数病原真菌有效，其作用机理是干扰病原菌有丝分裂中纺锤体的形成，影响细胞分裂，起到杀菌作用。对柑橘树炭疽病具有较好防效。

柑橘在生产、储藏和运输过程中容易发生炭疽病和酸腐病等病害，目前常用采摘前喷药和采摘后浸药两种方式，但是用药种类和方式没有统一的标准，氟环唑和多菌灵作为低毒高效的杀菌剂，可有效治疗柑橘的炭疽病等。目前关于柑橘中氟环唑和多菌灵的超高效液相色谱串联质谱检测方法未见相关报道。

发明内容

本发明的目的在于针对目前氟环唑和多菌灵在柑橘中广泛使用但分析方法缺失的现状，提供一种超高效液相色谱串联质谱法检测柑橘全果和果肉中氟环唑和多菌灵的方法，其具有灵敏度高、重现性好、有机溶剂用量少等特点，可满足氟环唑和多菌灵残留分析要求。

为了达到上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种检测柑橘全果和果肉中氟环唑和多菌灵残留量的超高效液相色谱串联质谱法，包括如下步骤：

(1)配制氟环唑和多菌灵的柑橘全果和果肉基质混合标准工作溶液：

称取10.00g经测定不含氟环唑和多菌灵的空白柑橘全果和果肉样品，加入40mL提取液(乙腈)，7g氯化钠，涡旋提取3min，4000rmp离心3min，取上清液；

取1.5mL上述上清液放入预先加有100mg PSA的离心管中，混匀，11000rmp离心3min，准确移取1mL上清液浓缩近干后，用乙腈：水(1:1V/V)定容至2mL，离过0.22μm滤膜，得到空白基质提取净化液；以空白基质提取净化液为溶剂配制氟环唑和多菌灵的柑橘全果和果肉基质标准工作溶液；

(2)用超高效液相色谱串联质谱法测定氟环唑和多菌灵的基质标准工作溶液中农药组分的提取离子峰面积，以浓度为横坐标，以提取离子峰面积为纵坐标绘制出氟环唑和多菌灵的标准工作曲线；

其中测定条件为：电离源模式：ESI；电离源极性：正；雾化气：氮气；鞘气压力：276kPa；离子传输管温度：350℃；喷针温度：320℃；离子喷雾电压：3500V；色谱柱HypersilGOLD C18(2.1mm×100mm 1.9μm)，柱温：35℃；流速：0.3mL/min；进样量：5μL；其他具体的质谱条件见表1。流动相B为甲醇溶液，流动相C为0.1％甲酸水溶液(v/v)，梯度洗脱条件见表2(表2中流动相B、C两种溶剂的比例均为体积比)。

表1氟环唑和多菌灵的质谱条件

表2梯度洗脱条件