[发明专利]基于UHPLC-Q-TOF/MS识别消痰通腑方化学成分的分析方法

权利要求书

1.基于UHPLC-Q-TOF/MS识别消痰通腑方化学成分的分析方法，所述消痰通腑方由法半夏、生大黄、制大黄、制南星、重楼和黄连配伍组成，其特征在于，包括如下步骤：

A、组分提取

采用醇提取或水提的方式获得免煎剂提取液；

B、样品前处理

取提取液以3000r/min的转速离心，取上层溶液15000r/min转速离心，取适量上清液于棕色进样小瓶中，待UHPLC-Q-TOF/MS分析；

C、UHPLC-Q-TOF/MS分析

色谱条件：选用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱，柱温：30℃，流速：0.3mL/min，进样量：1μL，检测波长：254nm，流动相：含0.1％甲酸的水溶液作为A相，乙腈作为B相，进行梯度洗脱，

质谱条件：ESI离子源，分别在正、负离子模式下采集数据；数据采集范围m/z 100～1700，离子源温度350℃，正离子模式下毛细管电压3.5kV、负离子模式下4.0kV，雾化气压力45Psi，干燥气流速11L/min，鞘气流速11L/min，鞘气温度350℃，碎片电压140V，

根据标准品和在线获得的化合物质谱数据，得到法半夏、生大黄或制大黄、制南星、重楼以及黄连的化学组分。

2.根据权利要求1所述的基于UHPLC-Q-TOF/MS识别消痰通腑方化学成分的分析方法，其特征在于，还包括配置对照品溶液的步骤：

称取葫芦巴碱、柠檬酸、奎宁酸、对香豆酸、大黄素甲醚、异佛莱心苷、芹糖异甘草苷、表小檗碱、甘草酸、大黄酸、重楼皂苷II、重楼皂苷H、重楼皂苷VI、芦荟大黄素、薯蓣皂苷、重楼皂苷I和大黄酚标准品，加入甲醇分别制成每1mL含对照品1mg的储备溶液；精密吸取上述储备溶液各10μL，置于1.5mL离心管中混合，涡旋混匀，加入甲醇配制成各标准品浓度分别为10μg/mL的混合标准溶液。

3.根据权利要求1所述的基于UHPLC-Q-TOF/MS识别消痰通腑方化学成分的分析方法，其特征在于，

其中，步骤A中，醇提取的方式如下：精密称定免煎剂摇匀、密塞，加入体积为免煎剂质量100倍的70％甲醇，称定质量后超声提取30min，放至室温，再次称定质量，并用甲醇补足减失的质量；

水提的方式如下：精密称定免煎剂，用100C开水搅拌5min，超声30min得水提液。

4.根据权利要求1所述的基于UHPLC-Q-TOF/MS识别消痰通腑方化学成分的分析方法，其特征在于：

其中，步骤B中，两次离心时间均为10min。

5.根据权利要求1所述的基于UHPLC-Q-TOF/MS识别消痰通腑方化学成分的分析方法，其特征在于：

其中，步骤C中，色谱分析时，进行梯度洗脱的程序如下：