[发明专利]一种双孢蘑菇液体菌种还原菌种及其栽培方法

说明书

本发明提供一种双孢蘑菇液体菌种还原菌种及其栽培方法，属于食用菌液体菌种生产应用技术领域，包括以下方法：(1)母种的制备；(2)液体菌种的制备；(3)菌丝体处理及接种栽培料；本发明通过运用双孢蘑菇液体菌种纯菌丝体栽培，可将固体菌种50天左右的传代周期缩短为12天，减少了菌种的退化可能；通过纯菌丝体栽培，使得菌种的质量和体积变小，大幅减少了运输成本；后期将菌丝体打碎，用无菌水缓冲液稀释后接种，形成的菌丝球大小均一，菌丝球个数多，且萌发点多、发菌快、菌丝生长一致性高；且纯菌丝体保存于4℃冰箱内可存放6d以上，使其菌种的新鲜程度加强，与此同时，纯菌丝体菌种体积小，更便于运输，减少运输成本。

技术领域

本发明属于食用菌液体菌种生产应用技术领域，具体涉及一种双孢蘑菇液体菌种还原菌种及其栽培方法。

背景技术

双孢蘑菇属真菌门(Eumycota)，担子菌纲(Basidiomycetes)，无隔担子菌亚纲(Homobasidiae)，伞菌目(Agaricales)，蘑菇科(Agaricaccae)，蘑菇属(Aparicus)，是世界性栽培和消费的菇类之一。双孢蘑菇子实体具有高蛋白、低脂肪的特点，而且含有丰富的多糖、矿物质元素、核苷酸、膳食纤维等，具有特殊的风味，深受广大消费者的喜爱。

目前我国双孢蘑菇的生产方式仍比较落后。栽培模式多采用固体逐级扩大培养方式，存在菌种的纯度低、生长周期长、菌龄不一致，且菌种生产成本较高，运输难度大等问题。

发明内容

1.解决的技术问题

本发明的目的在于提供一种双孢蘑菇液体菌种还原菌种及其栽培方法，运用液体菌种代替固体菌种进行生产，提高菌种品质，建立一种适合双孢蘑菇液体菌种生产的工艺，以解决固体菌种生产的不足，同时，为了避免液体菌种直接接种栽培料而造成污染，通过对发酵的液体菌种进行过滤，清洗，在接种前进行稀释，制作了一种便于贮藏和运输的菌种，使得菌种的质量和体积变小，大幅减少了运输成本，针对固体菌种及现有液体菌种的不足和缺陷，运用纯菌丝化的方法，去除液体菌种中多余的水分和糖分，低温保存，有利运输，为双孢蘑菇液体菌种的使用推广提供新的方向。

2.技术方案

为解决上述问题，本发明采用如下的技术方案

一种双孢蘑菇液体菌种还原菌种栽培方法，包括以下步骤：

S1、母种的制备：选取双孢蘑菇二次发酵料干料50g，琼脂条15g，纯净水1L，将双孢蘑菇二次发酵料干料放置进纯净水中煮20min，煮至完成后使用4层纱布进行过滤，得到浸液，将琼脂条投入得到的浸液内，继续加热，加热过程中不断搅拌，以免琼脂糊底烧焦，待琼脂条完全融化后再将其分装到三角瓶内进行121℃,30min灭菌，灭菌完成后进行倒平板，冷却后接种，25℃培养15d；

S2、液体菌种的制备：

液体培养基配方为豆粕粉2g，玉米粉2g，蔗糖20g，KH₂PO₄ 1g，MgSO₄ 1g，水1L；称取蔗糖20g，KH₂P0₄ 1g，MgSO₄ 0.5g，纯净水1L进行加热溶解，按照配方2g黄豆粉和2g玉米粉按配方加入500mL三角瓶中，待溶解后，分装在250mL在500mL的三角中进行121℃,30min灭菌，冷却后，将培养好的母种接种3mm大小的菌块8-10块到液体培养基中。将接种好的液体菌种，通过磁力搅拌器对其进行搅拌，温度设置为25℃，转速设置为1200r/min搅拌0.5-2h，搅拌完成后，待接种的母种菌块被打碎后，并将三角瓶放置在摇床上，温度设置为25℃，转速设置为150r/min培养12d得到液体菌种，将得到液体菌种进行按照配方豆粕粉2g，玉米粉2g，蔗糖20g，KH₂PO₄ 1g，MgSO₄ 1g，水1L进行发酵罐发酵，发酵得到的液体菌种备用；