[发明专利]一种芽孢杆菌新菌株HSY204及其杀虫基因和应用

说明书

本发明提供一种芽孢杆菌新菌株HSY204及其杀虫基因和应用，芽孢杆菌新菌株HSY204的分类命名为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)HSY204，其包括3个新型杀虫基因；经过生物活性测定表明菌株HSY204及其杀虫基因对埃及伊蚊幼虫具有很高的毒性，对蚊子的生长具有明显影响，可应用防控蚊虫，有效降低蚊媒疾病大规模传播的风险。

技术领域

本发明涉及环境微生物领域和分子生物学技术领域，特别涉及一种芽孢杆 菌新菌株HSY204及其杀虫基因和应用。

背景技术

蚊虫是我们熟悉的一种害虫，它的种类繁多，已知全世界有3200多种，其 中我国已知蚊类达18个属48个亚属和371种或亚种。蚊虫不仅严重影响我们 的生活，更重要的是它是传播多种疾病的媒介。目前在我国吸血并能传播疾病 的蚊种有10多种。以蚊子为媒介传播的病在预防医学中占有重要地位，因为蚊 类传播的转播力强、发病率高、危害性大。其传播的疾病主要有疟疾、登革热、 丝虫病、流行性乙型脑炎和寨卡等，严重地危害着人民群众的身体健康。

近年来我国一些老的以蚊子为媒介传播的疾病不断复发，并且新的以蚊子 为媒介传播不时出现，因此对蚊子的防治受到广泛关注。蚊子防控的主要策略 有环境防治、化学防治和生物防治等。环境防治效率较低；化学防治效率高、 见效快但污染环境，短时间内会导致抗性产生、高残，甚至直接导致人畜中毒。 而生物防治既是用一种生物控制另一种生物或者利用生物本身的特点来控制， 其最大的优点是比环境比较友好、成本低。

目前随着对杀蚊活性的菌株中晶体蛋白结构和有关分子作用机理的不断广 泛而深入研究，并通过利用现代生物技术手段提高杀蚊效果。无疑，研究高效 的菌株生物杀虫剂，对控制蚊虫具有非常重要的现实意义。研究杀蚊作用机理 的关键是受体。Pootanakit等已从埃及伊蚊(Aedes aegypti)中肠中鉴定出两种晶 体蛋白作用受体——氨肽酶N异构体。Charles等发现以色列亚种晶体蛋白作 用于伊蚊的肠道上皮细胞导致其组织病理学变化与鳞翅目昆虫中的情况相似。 芽孢杆菌是一类兼性厌氧或好氧，革兰氏阳性杆菌的总称，产芽孢，生理特征 丰富多样，分布极其广泛，是植物体表、根际和土壤、空气的重要微生物种群。 芽孢杆菌是一类产生大量的不同化学结构的多肽抗菌物质的物种。蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)是环境中常见的食源性致病菌之一，兼性好氧。生长温度 范围20～45℃，10℃以下生长缓慢或不生长，存在于土壤、水、空气以及动物肠 道等处，可产生抗菌物质，抑制有害微生物的繁殖，降解土壤中的营养成分， 改善生态环境，但目前对于蜡样芽孢杆菌在杀虫剂方面中的应用未见报导。

发明内容

鉴以此，本发明提出一种芽孢杆菌新菌株HSY204及其杀虫基因和应用， 蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)HSY204是海森元生物科技有限公司从海南热带雨 林分离一株菌。蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)HSY204进行生物测定结果表明该 菌对蚊子具有高毒力，明显对蚊子的生长具有影响，预示着该菌在防治蚊虫方 面有着良好的应用前景。

本发明的技术方案是这样实现的：

本发明提供一种芽孢杆菌新菌株HSY204，其分类命名为蜡样芽孢杆菌 (Bacilluscereus)HSY204，于2020年9月21日保藏于中国典型培养物保藏中心， 保藏编号为：CCTCCNO.M2020523。保藏地址为：中国.武汉.武汉大学。

进一步说明，蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)HSY204包括3个新型杀虫基因orf5878、orf5055和orf5877；其中，orf5878、orf5055和orf5877的DNA序列分 别如SEQ IDNO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列。

进一步说明，所述3个杀虫基因orf5878、orf5055和orf5877的氨基酸序列 分别如SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6所示的氨基酸序列。