[发明专利]一种黄柳的组织培养方法

说明书

本发明公开了一种黄柳的组织培养方法。本发明通过组织培养繁殖方法，利用较少的植物枝条实现了柳条的大量繁殖。该方法可减少对现有植被的破坏，为治沙材料的规模化生产提供技术支撑，具有重要的应用价值。

技术领域

本发明属于植物领域，涉及一种黄柳的组织培养方法。

背景技术

黄柳(Salix gordejevii)是杨柳科柳属的落叶丛生直立灌木，普遍分布于草原带的流动、半流动沙地上。由于黄柳适应于流沙，萌芽力强，受流沙掩埋易生不定根和不定芽，形成新的枝条和根系，无性繁殖容易，且抗风能力强，是极佳的先锋固沙物种，在人工治沙中广泛应用，效果良好。在一定范围内，黄柳株丛的生长速度与沙埋深度成正相关，只要沙埋不超过树冠，沙层越厚、生长越旺盛，最终往往形成高大的黄柳沙包。

在内蒙古中东部的沙化草地治理过程中，往往采用枝条扦插育苗进行沙地治理。实际操作过程中，往往先于冬季黄柳树液停止流动后，割取生长健壮且无病虫害的1～2年生枝条，经冬季低温避光窖存，在第二年春季土壤解冻后取出进行扦插育苗。由于扦插所需的黄柳插条需要割取大量成年柳条，容易对原有植被造成破坏，不利于原有植被的保护。

发明内容

本发明的目的是提供一种黄柳的组织培养方法。

本发明提供的黄柳的组织培养方法，包括：

1)外植体消毒

取黄柳的当年的嫩枝条作为外植体进行消毒，得到消毒后的外植体；

2)将步骤1)所得消毒后的外植体选用接种培养基进行培养，培养3-7天后转入增殖培养基，至形成芽团，再将所述芽团转入壮苗培养基，，再剪下大苗置于生根培养基中生根，得到组培苗；

原有的芽团每30天左右接转至新的壮苗培养基；

所述接种培养基的组成如下：MS+6-BA(1mg/L)+NAA(0.3mg/L)+糖(30g/L)

所述增殖培养基的组成如下：MS+6-BA(1.5-2.0mg/L)+NAA(0.3mg/L)+糖(30g/L)

所述壮苗培养基的组成如下：MS+6-BA(0.05mg/L)+NAA(0.3mg/L)+糖(30g/L)所述生根培养基的组成如下：1/2MS+NAA(0.3mg/L-0.5mg/L)+糖(20g/L)；

上述培养基中，各组分的百分比是指在整个培养基中的浓度；

3)步骤2)所得组培苗的根长2cm时即可出瓶，炼苗一周，出瓶洗净培养基后，定植，完成所述黄柳的组织培养。

上述方法的步骤1)中，所述外植体为当年黄柳嫩枝条上的顶芽和/或腋芽。

具体的，所述消毒可按照各种常规方法进行，如可按照如下方法进行：将嫩枝条放入烧杯加入几滴洗涤灵，加水后在自来水下冲洗至无泡沫，并重复一次。自来水冲洗时间不易过长以免造成外植体二次污染。拿到超净工作台准备消毒接种。用剪刀把嫩枝条剪到3-4cm长放入消毒用的磨口瓶中，在超净台中先用70％的酒精浸1分钟，无菌水冲洗2次，再用0.2％的氯化汞(加入两滴吐温)消毒10分钟左右，最后用无菌水洗6次而得。具体消毒时间可根据材料的鲜嫩程度和大小进行调整。

所述步骤2)用接种培养基进行培养步骤中，条件如下：23±1℃，光照时长为12小时，光照强度2000Lx，pH值为5.8～5.9；

所述步骤3)还包括：在所述出瓶洗净培养基步骤之后，定植之前，将幼苗用多菌灵或菌清1000倍液清洗并浸泡幼苗根部。

所述定植所用栽培基质为消毒过的由草碳土和沙等质量混合而得的混合物。

所述定植步骤中，定植环境的条件如下：塑料棚保持空气相对湿度60～80％，适当遮荫，环境温度为25℃±1℃。