[发明专利]氢巯基氧化酶1激动剂和索拉菲尼联合在制备治疗肝癌细胞中的应用

说明书

本发明提供了一种氢巯基氧化酶1激动剂和索拉菲尼联合在制备治疗肝癌细胞中的应用，其中，氢巯基氧化酶1激动剂包括过表达氢巯基氧化酶1的慢病毒和重组氢巯基氧化酶1蛋白，首先构建过表达氢巯基氧化酶1的慢病毒，然后转染靶细胞，氢巯基氧化酶1激动剂的剂型包括口服制剂、针剂或缓释制剂等；本发明同时使用过表达QSOX1慢病毒和索拉非尼对肝癌细胞作用，QSOX1不仅能抑制肝癌细胞活力，还能更加明显地减少GSH含量，增加细胞内游离亚铁离子和脂质过氧化水平，从而促进细胞铁死亡；故过表达QSOX1慢病毒联合索拉非尼能够协同促进对肿瘤生长的抑制作用，具有更强的杀伤作用。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种氢巯基氧化酶1激动剂和索拉菲尼联合在制备治疗肝癌细胞中的应用。

背景技术

肝癌在2018年全球恶性肿瘤新发病例中排名第六位，死亡病例数排名第四位，是一种凶险的消化系统恶性肿瘤。尽管在肿瘤早期病人，尤其是“小肝癌”的病人，通过外科手术治疗可以取得较好的预后，但由于肝癌往往起病隐匿，被确诊时大多已是中晚期，病人因此失去根治性手术机会，其自然病程约3至6个月。对于这部分病人只能进行姑息性治疗和系统化学治疗，预后极差。

索拉非尼是目前肝癌治疗指南中推荐的一线用药，主要用于中晚期肝癌患者，也用于接收肝癌切除术患者的术后辅助治疗。但其平均只能使生存期延长约2.8个月，治疗效果仍十分有限。因此，若能打破肝癌细胞对索拉非尼的治疗抵抗将对中晚期肝癌的临床治疗具有重要意义。早有研究发现，索拉非尼除了能够抑制多靶点激酶外，同时还能够诱导肿瘤细胞铁死亡从而杀伤肿瘤细胞。利用细胞铁死亡机制杀伤肿瘤并不是全新的概念，但由于肿瘤细胞往往自身发展出强大的抗氧化能力，利用铁死亡治疗肿瘤的效果并不是很理想。

细胞铁死亡是新近发现的一种细胞死亡方式，也是目前细胞死亡领域研究的热点。如何通过加强铁死亡来提高索拉非尼的疗效，研究很少，尚没有报道通过铁死亡增加索拉非尼疗效的制剂和方法。另外，铁死亡依赖于细胞内的铁和抗氧化能力的减弱。在一些肿瘤中已证实诱导癌细胞的铁死亡较诱导凋亡等其他形式的死亡更容易，易于临床推广。

氢巯基氧化酶1(Sulfhydryl oxidase 1,QSOX1)是一种能够催化蛋白分子中自由巯基生成二硫键的酶类，参与蛋白质翻译后折叠影响其生物学功能。近年来越来越多的研究发现 QSOX1蛋白与肿瘤密切相关。现有技术已研究证实QSOX1在肝癌中扮演着抑癌基因的角色，但对其在肝癌细胞中参与的生物功能仍不完全清楚，目前也尚未有应用QSOX1激动剂与索拉非尼联用提高肝癌治疗效果的报道。

发明内容

针对目前中晚期肝癌的治疗方案难以有效控制肿瘤生长和病情进展，而索拉非尼治疗肝癌的效果也十分有限，本发明提供了QSOX1激动剂与索拉菲尼联用在提高肝癌治疗效果中的应用。

索拉非尼对肝癌细胞的杀伤主要靠诱导铁死亡，而肝癌细胞对索拉非尼诱导的铁死亡产生耐受，使肝癌对索拉非尼治疗不敏感。我们在体外细胞实验和肝癌移植动物模型中证实 QSOX1增强肝癌细胞对索拉非尼的敏感性及对肿瘤的杀伤作用，所以使用慢病毒转染等方法提高QSOX1基因转录，使肿瘤细胞产生更多的QSOX1蛋白，以增加肿瘤细胞对索拉非尼的敏感性。或使用重组QSOX1蛋白与索拉非尼联用，以增加索拉非尼对肝癌的杀伤力。本发明的 QSOX1激动剂是具有QSOX1蛋白活性的物质，或能提高QSOX1基因转录的物质，例如人重组QSOX1蛋白；使用慢病毒转染等方法提高QSOX1基因转录。由于慢病毒过表达翻译产生的 QSOX1蛋白与重组QSOX1蛋白都经过真核生物细胞内蛋白折叠形成，两者都具有QSOX1生物活性，因此作为激动剂使用。

为达到上述目的，本发明的解决方案是：

一种氢巯基氧化酶1激动剂和索拉菲尼联合在制备治疗肝癌细胞中的应用。

进一步地，氢巯基氧化酶1激动剂选自过表达氢巯基氧化酶1的慢病毒和重组氢巯基氧化酶1蛋白中的一种以上。