[发明专利]一种功能化聚合物胶束PM-TLK及其制备方法和应用

说明书

一种功能化聚合物胶束PM‑TLK及其制备方法和应用，属于纳米生物医药材料领域。该胶束由可降解的聚己内酯‑b‑聚乙二醇嵌段共聚物(PCL‑b‑PEG)胶束与表面功能化多肽(D)‑TLKIVW构成。(D)‑TLKIVW能与Tau蛋白相互作用，但本身疏水性较强容易聚集在生理条件下作用效果较差。PCL‑b‑PEG是一种高生物相容性和可降解性的聚合物，还具有较好的抗蛋白吸附与血液长循环性能。该功能化聚合物胶束能够高效结合Tau蛋白聚集体，在体外抑制Tau蛋白聚集，还能阻止Tau蛋白聚集体种子向神经细胞传播，并且聚合物胶束‑Tau复合物还能促进Tau聚集体的降解。这种聚合物胶束提高了多肽的溶解性与稳定性，增强了作用能力，并且制备工艺简单，在阿尔兹海默症治疗方面具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明属于纳米生物医药材料领域，涉及一种用于抑制Tau蛋白聚集并阻止Tau聚集体向神经细胞传播的功能化聚合物胶束的制备和应用。

背景技术

阿尔兹海默病(Alzheimer disease,AD)，又称老年痴呆症，是大脑半球的语言、记忆和推理等智能处于受损状态而产生的一种神经退行性疾病，是老龄人口中发病率最高的疾病之一，严重危害人类健康，但目前仍旧缺乏有效的药物和治疗方法。AD最重要的病理特征是胞外β淀粉样蛋白(Aβ)沉积形成的淀粉样斑块和神经细胞内的Tau蛋白形成的神经纤维缠结。最近，以Aβ为靶点的部分药物在三期临床试验中以失败告终，预示着Aβ可能不是最根本的治病因素，而越来越多的研究发现Tau蛋白病变与AD发病之间具有比Aβ有更好的相关性。因此开发以Tau蛋白为靶点治疗AD的方法具有更大的意义和紧迫性。

Tau蛋白聚集会使Tau蛋白丧失其正常的生理功能，并且导致细胞轴突受损损害细胞内物质传输，而且Tau蛋白聚集体还会向正常的神经细胞传播，造成大量神经细胞死亡。因此在疾病早期通过抑制Tau蛋白聚集来治疗AD是一种可行的手段，能够阻止或者延迟AD的发病。目前研究人员已经发现一些有机小分子、多肽具有在体外抑制Tau蛋白的作用，但是在它们的生物相容性、稳定性存在一定的问题。多肽药物具有无免疫原性、易于合成、特异性强等特点，目前经过分子对接和高通量筛选已经得到一些Tau蛋白多肽抑制剂，但这些抑制剂也存在疏水性强易聚集、细胞毒性、难以跨越细胞膜屏障等问题。

随着纳米技术的发展，纳米粒子在药物递送方面发挥着越来越重要的作用。聚合物纳米粒子如聚己内酯-聚乙二醇(PCL-b-PEG)具有很高的生物相容性和生物稳定性，并且在生物体内可降解，还具有很好的长循环性能，常用于药物递送，而且表面易于修饰。

发明内容

本发明目的是克服现有技术与不足，将小分子多肽抑制剂与聚合物纳米粒子的优势相结合，得到表面修饰多肽的功能化聚合物胶束，改善了多肽抑制剂的溶解性低、稳定性差等缺陷，而且引入纳米效应，增强对Tau蛋白聚集的抑制作用并阻止Tau聚集体向神经细胞传播，聚合物胶束-Tau复合物还能促进Tau聚集体的降解，并且制备工艺简单，对于以Tau蛋白为靶点的AD治疗具有广阔的应用前景。

本发明的技术方案

一种功能化聚合物胶束PM-TLK，所采用的多肽是D构型多肽苏氨酸-亮氨酸-赖氨酸-异亮氨酸-缬氨酸-色氨酸((D)-Thr-Leu-Lys-Ile-Val-Trp,(D)-TLKIVW，简写为TLK)，聚合物是聚己内酯-聚乙二醇PCL-b-PEG，最终合成得到PCL_5k-b-PEG_5k-TLKIVW聚合物，在水溶液中自组装形成平均粒径38nm的聚合物胶束，该聚合物胶束表面有TLKIVW多肽。

一种功能化聚合物胶束PM-TLK及其制备方法，制备过程如下：

1)PCL-b-PEG与PCL-b-PEG-NHBOC的合成；