[发明专利]一种提高冰菜种子种子萌发率与幼苗生存率的方法和应用

说明书

本发明涉及一种提高冰菜种子种子萌发率与幼苗生存率的方法，步骤如下：⑴挑选颗粒饱满、无瑕疵的灰褐色冰菜种子，先用清水冲洗，种子浸泡在无菌水中，然后在20℃条件下加入75％酒精，再加入吐温‑80和NaClO溶液处理，清水清洗3‑7次，即得处理后冰菜种子；⑵将处理后冰菜种子接种到MS培养基上，置于20℃光照下培养即可。本发明方法通过处理处于无外源污染，有利于无病毒冰菜种苗的大量繁殖，避免炼化环节中外源病毒，病菌的感染，提高了冰菜种子种子萌发率与幼苗生存率，为后期育种与生产工作奠定基础。

技术领域

本发明属于分子育种技术领域，尤其是一种提高冰菜种子种子萌发率与幼苗生存率的方法和应用。

背景技术

冰菜(Mesembryanthemum crystallinum L.)，又名冰叶日中花，属番杏科日中花属1年生或2年生草本植物，原产于非洲西奈、南欧地区。冰菜是兼性CAM植物，具有耐盐碱、耐旱性的特征，其叶表和茎部覆盖着大量凸起的盐囊泡细胞，富含矿物盐、糖醇、果酸、氨基酸、甜菜碱、类黄酮等，具有极高的营养价值，由于其对治疗糖尿病有帮助作用，所以越来越受到亚洲地区植物工厂的重视。

冰菜作为一种新型蔬菜，在国内栽植情况处于起步阶段，育种研究尚未见报道。现代育种大多进行转基因技术育种和分子标记辅助育种，而无菌苗的筛选和培育是关系到试验能否成功的关键环节，无菌苗通常是由种子获得，因此，种子消毒显得尤为重要。

通过检索，尚未发现与本发明专利申请相关的专利公开文献。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术中存在的大量使用有机溶剂，且反应时间过长的不足之处，提供一种提高冰菜种子种子萌发率与幼苗生存率的方法和应用。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种提高冰菜种子种子萌发率与幼苗生存率的方法，步骤如下：

⑴挑选颗粒饱满、无瑕疵的灰褐色冰菜种子，先用清水冲洗，种子浸泡在无菌水中，然后在20℃条件下加入75％酒精，再加入吐温-80和NaClO溶液处理，75％酒精：种子的比例ml：粒种子为50:1000，吐温-80：种子的比例为ml：粒种子为0.1:1000，NaClO溶液：种子的比例ml：粒种子为50:1000，清水清洗3-7次，即得处理后冰菜种子；

⑵将处理后冰菜种子接种到MS培养基上，置于20℃光照下培养即可。

而且，所述NaClO溶液的质量浓度为6-7％；所述酒精体积浓度为75％。

而且，将冰菜种子置于NaClO溶液中浸泡10min，进行消毒处理。

如上所述的提高冰菜种子种子萌发率与幼苗生存率的方法在提高冰菜种子消毒效果、种子萌发、幼苗生长方面中的应用。

本发明取得的优点和积极效果为：

1、本发明方法通过处理处于无外源污染，有利于无病毒冰菜种苗的大量繁殖，避免炼化环节中外源病毒，病菌的感染，提高了冰菜种子种子萌发率与幼苗生存率，为后期育种与生产工作奠定基础。

2、本发明中萌发率效果较优的是6％NaClO与7％NaClO；种子24h浸出液的电导率，6％NaClO最低，表明其种子表皮及细胞膜受损情况最低。本发明中种子萌发过程需要大量地能量消耗，而其萌发过程中能量的唯一来源就是种子内贮藏物的氧化分解，分解贮藏物类酶的活性变化是反映消毒剂对于种子萌发影响的一个重要因素。6％NaClO的β-淀粉酶和蛋白酶活性最高，10％NaClO的α-淀粉酶活性最高。

3、本发明比较表观的胚轴、胚根的生长情况以及鲜质量、干质量的积累情况可知，6％NaClO的胚轴生长情况最优；而3％NaClO的胚根生长情况较弱；鲜质量的积累以6％NaClO最优，干质量积累以10％NaClO最优。