[发明专利]拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin及其应用

说明书

本发明公开了拟穴青蟹抗菌多肽Sp‑LECin及其应用。该抗菌多肽Sp‑LECin的分子式为C₁₁₇H₁₈₅N₂₉O₂₆S₁，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的拟穴青蟹抗菌多肽Sp‑LECin具有抗细菌活性及抗真菌活性，抗菌效果好，抗菌谱广，杀菌速率快，其来源于甲壳动物，既可以应用于水产饲料添加剂，也可以研制成为防腐剂、抗菌防霉剂和抗菌药物等，具有广泛的应用前景。

技术领域

本发明属于海洋分子生物学技术领域，具体涉及多肽及其应用。

背景技术

由于抗生素在医疗卫生和养殖业等领域的滥用，全球性抗生素污染问题日趋严峻，亟需开发新型抗耐药性细菌感染、可替代抗生素的治疗药物。抗菌肽(AntimicrobialPeptide，AMP)是存在于各种生物体中的一种重要的先天性免疫因子，具有抗细菌、真菌、病毒和寄生虫等免疫特性，因其不同于传统抗生素，不易产生耐药性，被科学家誉为“天然抗生素”。根据携带电荷性质的不同分为阳离子抗菌肽和阴离子抗菌肽，大多数抗菌肽属于阳离子抗菌肽，通常富含赖氨酸和精氨酸等带有正电荷及疏水性的氨基酸残基。抗菌肽在生物体内不仅具有抗菌功能，还能通过不同的途径调节机体的免疫反应，是机体先天性免疫系统中重要的组成部分。

目前抗菌肽库中收录的抗菌肽多数是基于已报道的抗菌肽序列、EST片段或结构域等分析获得的，新型抗菌肽的发现仍是少数。海洋动物由于其生存在复杂甚至极端的海洋环境，且以无脊椎动物居多，主要依靠先天性免疫系统来维持健康生存，抗菌肽是其先天性免疫的重要因子。甲壳动物等无脊椎动物缺乏获得性免疫，抗菌肽等免疫效应分子在外界病原微生物入侵时能够在体内迅速合成并释放以抵御感染，在无脊椎动物的先天性免疫系统中发挥重要的作用。

拟穴青蟹(Scylla paramamosain)，简称青蟹，是我国东南沿海重要的养殖品种，具有较高的营养价值和经济价值。目前在青蟹中已经发现并成功分离了多种具有广谱抗微生物活性的抗菌肽，如ALFs、crustins、源于组蛋白H2A的Sphistin、在血细胞中高表达的SpHyastatin以及在青蟹生殖免疫中起重要作用的scygonadin和SCY2等。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供了拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin及其应用。基于前期建立的人工感染青蟹转录组数据库，从中获得一条抗菌多肽，将其命名为Sp-LECin。该多肽Sp-LECin具有抗细菌及抗真菌活性，抗菌效果好，抗菌谱广，杀菌速率快，其来源于甲壳动物，既可以应用于水产饲料添加剂，也可以研制成为防腐剂、抗菌防霉剂和抗菌药物等，具有广泛的应用前景。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案之一是：

一种拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，具体为：Gly-Cys-Val-Phe-Leu-Leu-Pro-Ala-Lys-Pro-His-Asn-Tyr-Lys-Lys-Val-Phe-Leu-Ser-Lys-Gly-Val。

所述拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin由22个氨基酸组成，分子式为C₁₁₇H₁₈₅N₂₉O₂₆S₁，分子量为2445.99道尔顿，其中含有4个带正电的氨基酸残基和0个带负电的氨基酸残基，根据氨基酸残基电荷预测该抗菌肽等电点为9.87，亲水性平均系数为0.25，是一种带有正电荷的阳离子多肽。

所述拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin可以以固体(如粉末等)、液体(如水溶液等)等多种形式应用。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案之二是：

上述的拟穴青蟹抗菌多肽Sp-LECin在制备抗菌剂中的应用。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案之三是：