[发明专利]一种靶向性竞争结合oar-miR-29b的circRNA及其应用

说明书

本发明公开了一种靶向性竞争结合oar‑miR‑29b的circRNA及其应用。本发明以不同发育阶段的健康雄性藏绵羊睾丸组织作为试验材料，通过RNA‑seq技术及相关生物信息学分析方法对睾丸中环状RNA进行鉴定分析，以挖掘与睾丸发育及功能维持相关的circRNA，该circRNA为circ_024949和/或环状RNA circ_026259，其中，circRNA circ_024949的核苷酸序列如SEQ ID No：1所示，环状RNA circ_026259的核苷酸序列如SEQ ID No：2所示。在此基础上，本发明公开了上述circRNA在作为检测藏绵羊睾丸功能或发育状况的标志物、在制备调控藏绵羊睾丸功能或发育的药物以及在下游靶基因BOLL的表达分析或研究中的应用。本发明环状RNA circ_029155能够用于检测和评价绵羊的睾丸发育和生精功能，为进一步探索绵羊睾丸发育及精子发生的分子作用机制以及后续应用开发奠定基础。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，尤其涉及一种靶向性竞争结合oar-miR-29b 的circRNA及其应用。

背景技术

睾丸作为生殖和内分泌系统的重要组成部分，主要功能是产生雄性配子(精子)和性激素，是维持成年雄性动物正常生殖功能所必需的生殖器官。睾丸内具有最多样的转录组，包括编码RNA(mRNA)和非编码RNA(如circRNA，lncRNA和miRNA)，通过高度协同作用参与调控睾丸的发育和精子发生过程。环状RNA(circRNA)作为一类具有闭合环状结构且在真核生物中丰富表达的内源性非编码RNA，可充当miRNA的海绵，调控下游基因的表达与功能。然而，目前在绵羊这种重要经济畜种上，有关circRNA在其睾丸发育及功能维持检测方面的应用尚处于空白阶段。

藏绵羊作为我国三大粗毛羊品种之一，主要分布于海拔3000m以上的青藏高原及其毗邻地区，为当地农牧民提供了极其重要的生活物资和经济收入，并且在高寒草甸草地生物多样性及生态系统功能中发挥重要作用。然而，由于其所生存的环境以及长期放牧且缺乏补饲，具有发育周期长、性成熟晚、繁殖力低下等特点，是探究绵羊睾丸发育及功能维持调控机制的理想品种。

发明内容

为了克服现有技术的缺点与不足，本发明的目的在于提供一种靶向性竞争结合oar-miR-29b的circRNA序列及其应用。

本发明是这样实现的，一种靶向性竞争结合oar-miR-29b的circRNA，该circRNA为环状RNA circ_024949和/或环状RNA circ_026259，其中，环状RNA circ_024949的核苷酸序列如SEQ ID No：1所示，环状RNA circ_026259的核苷酸序列如SEQ ID No：2所示。

本发明进一步公开了上述circRNA在作为检测藏绵羊睾丸功能或发育状况的标志物中的应用。

本发明进一步公开了上述circRNA在制备调控藏绵羊睾丸功能或发育的外源性药物中的应用。

优选地，所述circRNA调控藏绵羊睾丸功能和发育是通过如下方式实现：所述circRNA序列竞争性靶向结合oar-miR-29b以调控下游靶基因IGF1的表达，实现藏绵羊睾丸功能或发育的调控。

本发明进一步公开了上述circRNA在下游靶基因IGF1的表达分析或研究中的应用。