[发明专利]Gli1和EpCAM基因共同标记的肝祖细胞群及其应用

权利要求书

1.细胞或细胞培养物的应用，用于：制备转分化形成肝细胞的组合物，制备进行肝脏损伤修复的组合物，或制备肝脏类器官；

其中，所述细胞为Gli1+细胞，且包括以下特征：(i)具有肝干/祖细胞特性，(ii)具有分化/转分化形成肝细胞的功能，(iii)具有肝脏损伤修复作用，和/或(iv)能够形成肝脏类器官。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述细胞为Gli1+和EpCAM+细胞。

3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述细胞还包括选自下组的特征：

具有上皮细胞特征，或表达上皮细胞标志物；

具有间充质细胞特征，或表达间充质细胞标志物；

能形成类器官且该类器官具有间胆管细胞特征，或表达胆管细胞标志物。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述胆管细胞标志物包括选自下组的标志物：KRT19、SOX9；

所述上皮细胞标志物包括选自下组的标志物：EpCAM，KRT7和KRT19；或

所述间质细胞标记物包括选自下组的标志物：PDGFRα和PDGFRβ。

5.如权利要求1～4任一所述的应用，其特征在于，所述的细胞包括传代的细胞。

6.一种分离的细胞或细胞培养物，所述细胞为Gli1+细胞且包括以下特征：(i)具有肝干/祖细胞特性，(ii)具有分化/转分化形成肝细胞的功能，(iii)具有肝脏损伤修复作用，和/或(iv)能够形成肝脏类器官。

7.如权利要求6所述的细胞或细胞培养物，其特征在于，所述细胞为Gli1+和EpCAM+细胞。

8.如权利要求7所述的细胞或细胞培养物，其特征在于，所述的细胞还包括选自下组的特征：

具有上皮细胞特征，或表达上皮细胞标志物；

具有间充质细胞特征，或表达间充质细胞标志物；

能形成类器官且该类器官具有间胆管细胞特征，或表达胆管细胞标志物。

9.如权利要求6～8任一所述的细胞或细胞培养物，其特征在于，所述Gli1+细胞通过包括以下的方法分离获得：利用特异性结合或捕获Gli1的结合分子或捕获分子，从肝组织的分离物中将Gli1+细胞分选出；或

所述Gli1+和EpCAM+细胞通过包括以下的方法分离获得：利用特异性结合或捕获Gli1和EpCAM的结合分子或捕获分子，从肝组织的分离物中将Gli1+和EpCAM+细胞分选出。

10.一种分离或富集细胞或细胞培养物的方法，所述细胞为Gli1+细胞且包括以下特征：(i)具有肝干/祖细胞特性，(ii)具有分化/转分化形成肝细胞的功能，(iii)具有肝脏损伤修复作用，和/或(iv)能够形成肝脏类器官；所述方法包括：利用特异性结合或捕获Gli1的结合分子或捕获分子，从肝组织的分离物中将Gli1+细胞分选出。

11.如权利要求10所述的方法，其特征在于，所述细胞为Gli1+和EpCAM+细胞，所述方法包括：利用特异性结合或捕获Gli1和EpCAM的结合分子或捕获分子，从肝组织的分离物中将Gli1+和EpCAM+细胞分选出。

12.如权利要求10或11所述的方法，其特征在于，所述分选细胞的方法包括：流式细胞分选法，免疫磁珠分选法，微流控细胞分选法，粘附法。

13.一种制备肝脏类器官的方法，包括：培养权利要求6～9任一所述的细胞或细胞培养物，使之生长和分化，从而获得肝脏类器官。