[发明专利]分离检测左亚叶酸钙中双（2-羟乙基）二硫化物的方法

说明书

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种高效液相色谱法分离检测左亚叶酸钙中双(2‑羟乙基)二硫化物的方法，该方法采用的色谱柱是以十八烷基键合硅胶为填充剂，采用有机溶剂和水的混合溶液作为流动相进行洗脱，将所述双(2‑羟乙基)二硫化物从左亚叶酸钙及相关物质中进行分离；所述相关物质为左亚叶酸钙的杂质；流动相流速为0.9～1.1ml/min；色谱柱柱温为25～35℃；检测器波长为247±10nm；该检测方法检测左亚叶酸钙中双(2‑羟乙基)二硫化物，其余各杂质不干扰该目标物的检测，专属性、耐用性均良好，得到准确的杂质含量，方法简单、快速、有效。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种HPLC法分离检测左亚叶酸钙中双(2-羟乙基)二硫化物的方法。

背景技术

左亚叶酸钙，分子式为C₂₀H₂₁CaN₇O₇，分子量：511.5，中文化学名：N-[4-[(6S)-(2-氨基-5-甲酰基-1,4,5,6,7,8-六氢-4-氧代-6-蝶啶基)甲基]氨基]苯甲酰基-L-谷氨酸钙盐水合物，目前注射用左亚叶酸钙主要用于治疗胃癌和结直肠癌，其结构式如下：

左亚叶酸钙中可能存在的杂质：双(2-羟乙基)二硫化物、杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H、杂质I、巯基乙醇等杂质；其中双(2-羟乙基)二硫化物，中文化学名：2,2’-二硫二乙醇，分子式C₄H₁₀O₂S₂，分子量154.25，其结构式如下：

而在目前相关研究中，并未发现对左亚叶酸钙中双(2-羟乙基)二硫化物的检测分析，不利于左亚叶酸钙药物的质量控制。

发明内容

有鉴于此，本发明目的之一是提供一种分离左亚叶酸钙中双(2-羟乙基)二硫化物的方法，该方法可有效将双(2-羟乙基)二硫化物从左亚叶酸钙及其他相关物质中进行分离。

为了实现上述目的，本发明的技术方案为：

分离左亚叶酸钙中双(2-羟乙基)二硫化物的方法，所述方法采用的色谱柱是以十八烷基键合硅胶为填充剂，采用有机溶剂和水的混合溶液作为流动相进行洗脱，将所述双(2-羟乙基)二硫化物从左亚叶酸钙及相关物质中进行分离；所述相关物质为杂质A～I中的一种或多种；所述左亚叶酸钙、双(2-羟乙基)二硫化物及相关物质结构式如下：

进一步，所述有机溶液与水的体积比为9～11:91～89；

进一步，所述有机溶液为乙腈、甲醇、乙醇中的一种或多种；

具体的，所述有机溶液为乙腈；

进一步，所述流动相流速为0.9～1.1ml/min；

进一步，所述色谱柱柱温为25～35℃。

本发明目的之二是提供一种HPLC法鉴定左亚叶酸钙检测物中是否存在双(2-羟乙基)二硫化物的方法，该方法可以有效确认左亚叶酸钙检测物中是否存在双(2-羟乙基)二硫化物。

为了实现上述目的，本发明的技术方案为：

鉴定左亚叶酸钙中双(2-羟乙基)二硫化物的方法，利用目的一中所述方法将左亚叶酸钙检测物中所述双(2-羟乙基)二硫化物从左亚叶酸钙和相关物质中进行分离，通入检测器进行检测，将检测得到的色谱图与双(2-羟乙基)二硫化物已知对照品色谱图进行对比，判定左亚叶酸钙检测物中是否含有所述双(2-羟乙基)二硫化物；

进一步，所述检测器波长设定为247±10nm。