[发明专利]一种维生素A、D3、E的液相色谱联检方法

权利要求书

1.一种维生素A、D3、E的液相色谱联检方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）配制标准溶液：分别称取维生素A标准品、维生素D3标准品、维生素E标准品，利用甲醇超声溶解、定容，分别配制成维生素A标准储备液、维生素D3标准储备液、维生素E标准储备液；

（2）配制标准工作液：分别从步骤（1）配制得到的维生素A标准储备液、维生素D3标准储备液、维生素E标准储备液中吸取10mL至100mL棕色容量瓶内，甲醇定容，制得标准工作液；

（3）待测试样溶液的配制：将待测试样加入至棕色容量瓶内，加入甲醇，升温、超声提取，然后冷却，定容，制得待测试样溶液；

（4）液相色谱联检：分别将标准工作液和待测试样溶液注入液相色谱柱进行液相色谱变波长检测，测出峰面积，计算出各维生素含量。

2.根据权利要求1所述的维生素A、D3、E的液相色谱联检方法，其特征在于，所述步骤（1）中，维生素A标准储备液的配制包括以下步骤：取0.01-0.05g维生素A乙酸酯于100mL棕色容量瓶内，加入甲醇，超声溶解，然后定容，制得维生素A标准储备液。

3.根据权利要求1所述的维生素A、D3、E的液相色谱联检方法，其特征在于，所述步骤（1）中，维生素D3标准储备液的配制包括以下步骤：取0.01-0.05g胆钙化醇于100mL棕色容量瓶内，加入甲醇，超声溶解，然后定容，制得维生素D3标准储备液。

4.根据权利要求1所述的维生素A、D3、E的液相色谱联检方法，其特征在于，所述步骤（1）中，维生素E标准储备液的配制包括以下步骤：取0.01-0.05g DL-α-生育酚乙酸酯于100mL棕色容量瓶内，加入甲醇，超声溶解，然后定容，制得维生素E标准储备液。

5.根据权利要求1所述的维生素A、D3、E的液相色谱联检方法，其特征在于，所述步骤（3）中，配制待测试样溶液的具体操作为：将0.5-1g待测试样加入至100mL棕色容量瓶内，加入60-80mL甲醇，搅拌均匀，升温至55-60℃，在超声频率为50-80KHz条件下超声提取30-40min，冷却，定容，制得待测试样溶液。

6.根据权利要求1所述的维生素A、D3、E的液相色谱联检方法，其特征在于，所述步骤（4）中，所述液相色谱柱为C18柱，规格为3.9×150mm，4.6μm粒径。

7.根据权利要求1所述的维生素A、D3、E的液相色谱联检方法，其特征在于，所述步骤（4）中，液相色谱变波长检测的温度为30-40℃，进样量为15-25μL，流速为0.5-1.5mL/min。

8.根据权利要求1所述的维生素A、D3、E的液相色谱联检方法，其特征在于，所述步骤（4）中，液相色谱变波长检测的流动相为体积比在95-99:1-5的甲醇和水。

9.根据权利要求1所述的维生素A、D3、E的液相色谱联检方法，其特征在于，所述步骤（4）中，液相色谱变波长检测的波长为285-326nm。

10.根据权利要求9所述的维生素A、D3、E的液相色谱联检方法，其特征在于，所述步骤（4）中，液相色谱变波长检测的波长条件为：检测时间为0.01min时，波长为326nm；检测时间为5.70min时，波长为326nm；检测时间为5.71min时，波长为264nm；检测时间为10.0min时，波长为264nm；检测时间为10.01min时，波长为285nm；检测时间为20.0min时，波长为285nm；检测时间为20.01min时停止波长检测。