[发明专利]肌肉中磺胺二甲基嘧啶检测样品的环境友好型前处理方法

说明书

肌肉中磺胺二甲基嘧啶检测样品的环境友好型前处理方法，在检测肌肉中磺胺二甲基嘧啶含量时，采用不含有机溶剂的提取液提取肌肉中的磺胺二甲基嘧啶，再用不含有机溶剂的稀释液对提取液进行稀释后进行检测。所述提取液的成分为：含有Tween‑20和PVP40000的柠檬酸缓冲溶液；样品稀释液的成分为：含有Tween‑80和PEG20000的磷酸盐缓冲溶液。本发明方法对包括虾肉在内的肌肉中磺胺二甲基嘧啶的提取率，可达90.47%‑109.48%；全程可在10min钟内完成，具有绿色、环保、快速等优点，适合肌肉组织类样品中磺胺二甲基嘧啶含量的现场快速、高通量处理。适用于基于单克隆抗体的免疫检测技术。

技术领域

本发明涉及一种肉类食品中磺胺二甲基嘧啶检测样品的前处理方法，尤其是涉及一种肉类食品肌肉中残存磺胺二甲基嘧啶含量检测样品的前处理方法。

背景技术

磺胺二甲基嘧啶是一种广谱抗菌剂，常用作饲料添加剂，用来防止葡萄球菌及溶血性链球菌等的感染。

水产品养殖业中，磺胺二甲基嘧啶的滥用导致虾等水产品中出现抗生素残留，虾肉及其他水产品中磺胺二甲基嘧啶的残留会危害食用者的健康，对我国虾等水产品的出口贸易也有重要影响。这就要求质检单位、海关等监管部门需要进行严格的监管，也需要企业、养殖户等，进行自我监督。

目前，针对水产品肌肉中残存的磺胺二甲基嘧啶的检测手段，主要分为两类：一类是传统的实验室仪器检测方法；另一类是现场的快速检测方法。

以高效液相色谱为代表的仪器检测方法，虽然有较高的灵敏度，但是其对样品的前处理要求十分严格，并且检测耗时长，需要专业人员操作，检测成本高，不适合批量样品的快速检测。

以基于单克隆抗体的酶联免疫检测方法和试纸条方法已经成为快速、高通量现场检测的主流方法，在企业、监管部门中都大量被采用。

但是，对于肌肉组织类样品，尤其是蛋白质含量高的虾肉之类样品，前处理过程依然相对复杂。由于肌肉组织类食品的基质比较复杂，目前已有的前处理方法，都会采用含有机溶剂的提取液来提取虾肉、猪肉中的抗生素残留。

有机溶剂的使用有两大弊端：首先，有机溶剂的使用会污染环境，与“绿色环保”理念不符；另外，高通量的现场检测往往缺乏专业的通风设备，会导致检测人员吸入易挥发的有机溶剂，危害他们的健康。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种具有环保、安全、快速优点的肉类食品肌肉中磺胺二甲基嘧啶检测样品的前处理方法。

本发明解决其技术问题采用的技术方案是，一种肉类食品肌肉中磺胺二甲基嘧啶检测样品的前处理方法，使用的磺胺二甲基嘧啶提取液为含有Tween-20和PVP10000的柠檬酸缓冲溶液；使用的稀释液为含有Tween 80和PEG20000的磷酸盐缓冲溶液。

进一步，所述柠檬酸缓冲溶液中，Tween-20的体积浓度为0.9-1.1%，PVP10000的质量体积浓度为0.9-1.1%（w/v）；所述磷酸盐缓冲溶液中，Tween 80的体积浓度4.5-5.5%，PEG20000的质量体积浓度为0.9-1.1%（w/v）。

进一步，所述柠檬酸缓冲溶液中，Tween-20的体积浓度为1.0%，PVP10000的质量体积浓度为1.0%（w/v），pH=7.2；所述磷酸盐缓冲溶液中，Tween 80的体积浓度5.0%，PEG20000的质量体积浓度为1.0%（w/v），pH=6.2。

进一步，本发明方法的具体操作步骤如下：

（1）提取液的配制：向柠檬酸缓冲溶液中加入Tween-20和PVP10000，混合均匀后，备用；

（2）稀释液的配制：向磷酸盐缓冲溶液中加入Tween 80和PEG20000，混合均匀后，备用；