[发明专利]抗旋毛虫排泄分泌抗原的卵黄抗体及制备方法和用途

说明书

本发明提供了一种抗旋毛虫排泄分泌抗原（ESA）鸡卵黄抗体，同时还公开了卵黄抗体在抗肿瘤中的医用用途；具有增强动物免疫力、无毒等特点，可作为口服制剂用于肺癌等肿瘤的治疗，同时也可制成口服液等做为食品用于预防肿瘤；鸡等禽类卵黄抗体可口服、使用方便、成本低、无毒、安全、便于大规模工厂化生产。

技术领域：

本发明涉及一种抗旋毛虫排泄分泌抗原（Excretory secretory antigen，ESA）的卵黄抗体，特别是公开了抗旋毛虫排泄分泌抗原（ESA）鸡卵黄抗体及制备方法；同时还该提供了卵黄抗体在抗肿瘤中的医用用途，属生物医药技术领域。

背景技术：

旋毛虫（Trichinella spiralis）是一种严重危害人类健康的人兽共患寄生虫，其成虫和幼虫分别寄生于哺乳动物的肠道和肌肉组织中。随着对旋毛虫研究的深入，人们发现旋毛虫除了能引起旋毛虫病外，其感染能提高宿主机体抗肿瘤的能力。有人利用致弱的旋毛虫治疗肿瘤患者，但存在严重的副作用，临床使用受到很大的限制。目前，已在旋毛虫与肿瘤细胞相关基因蛋白抗原的多抗和单抗方面做了一些研究，发现旋毛虫与肿瘤相关基因蛋白抗原的多抗和单抗对体外肿瘤细胞有抑制作用，并针对这些相关蛋白抗原制备的鼠血清和单克隆抗体均在动物实验中取得了一定的抗肿瘤效果，但上述使用的抗体均为注射使用，临床推广应用存在较大困难。尚无利用抗旋毛虫排泄分泌抗原（Excretory secretoryantigen，ESA）的禽卵黄抗体口服用于肿瘤防治的报道。

发明内容：

本发明提供了一种抗旋毛虫排泄分泌抗原（Excretory secretory antigen，ESA）鸡卵黄抗体及制备方法，具有使用方便、成本低、无毒、安全等优点，适用于规模化生产。

本发明进一步公开了旋毛虫排泄分泌抗原（ESA）鸡等禽类卵黄抗体的用途，具有增强动物免疫力、无毒、无害等特点，可作为口服制剂用于肿瘤的治疗，同时也可制做成口服液等做为食品用于肿瘤预防。

本发明所述的一种抗旋毛虫排泄分泌抗原（ESA）鸡卵黄抗体，具有以下表征：

1、SDS-PAGE检测显示该卵黄抗体重链约为68KDa，轻链约为38KDa。

2、ELISA和Western blot检测显示该卵黄抗体可与旋毛虫ESA发生结合反应。

本发明所说的一种旋毛虫排泄分泌抗原（ESA）鸡卵黄抗体的制备方法，包括以下步骤：

将感染旋毛虫的小鼠肌肉消化后，依次过60目和120目筛网去除杂质，并利用水洗沉淀法富集、纯化肌幼虫，PBS反复洗涤后，添加15ml PBS于37℃恒温培养72h。收集培养液离心取上清即为肌幼虫ESA，用滤器过滤除杂质，最后，用3KDa的超滤管于4℃，6500r/min超滤至5ml，BCA法测浓度后。用ESA免疫罗曼母鸡，收集鸡蛋分离蛋黄，采用梯度PEG6000法分离纯化卵黄抗体获得。

本发明所述的抗旋毛虫排泄分泌抗原（ESA）鸡卵黄抗体在防治肿瘤药物中的医用用途。

本发明所述的抗旋毛虫排泄分泌抗原（ESA）鸡卵黄抗体具有防治肺癌的医用用途。

下述的药理试验证实了抗旋毛虫排泄分泌抗原（ESA）的卵黄抗体具有显著的抑制肿瘤生长的作用，可以作为防治肿瘤的制剂被应用：