[发明专利]一种动态加压组织工程瓣膜细胞接种器的使用方法

说明书

本发明涉及一种动态加压组织工程瓣膜细胞接种器及其使用方法，包括上基座、上盖、下基座、下盖和瓣膜夹具，所述上基座内设有上部液室，所述下基座内设有下部液室，所述上盖内设有上部气室，所述下盖内设有下部气室，所述上盖与所述上基座连接，所述上部气室和所述上部液室之间设有上部隔膜，所述下盖与所述下基座连接，所述下部气室和所述下部液室之间设有下部隔膜，所述瓣膜夹具设置在所述上部液室内，所述上基座和所述下基座通过卡扣连接。本发明用于人体心脏组织工程瓣膜的细胞接种，可以实现种子细胞的加压动态培养，使种子细胞均匀接种于支架材料，并在压力作用下可进入瓣膜支架内部，实现支架的全面细胞化，避免细胞脱落。

技术领域：

本发明专利涉及生物医学工程技术领域，具体涉及一种动态加压组织工程瓣膜细胞接种器的使用方法。

背景技术：

目前，全球心脏病发病率逐年升高，患病人数不断增加，心脏瓣膜疾病的发病率也呈上升趋势，全球每年有超过30万例心脏瓣膜手术。心脏瓣膜手术的主要手术方式为瓣膜替换术，而目前临床上主要使用的两种瓣膜替代物：机械瓣与生物瓣均有其缺陷。机械瓣需要终身抗凝治疗，存在出血和血栓栓塞的风险；生物瓣使用寿命有限，约为10-15年，许多病人面临二次换瓣的风险。目前普遍认为组织工程瓣膜是最有希望的理想瓣膜替代物，因为其具有无需抗凝，可终身使用的优点。

组织工程瓣膜的构建是将种子细胞接种在瓣膜支架上进行体外培养，当形成新的细胞外基质及完整的细胞层后即可植入体内。但目前组织工程瓣膜并没有走上临床应用，主要问题是种子细胞及培养条件的问题。以往大多研究采用静态接种静态培养的方式，这种方式操作简单，但存在细胞接种不均匀，接种效率低的问题。专利号为ZL200810232069.1的专利通过采用环氧氯丙烷(C3H5Cl)通过交联反应在交联去细胞支架本身胶原和弹性蛋白的同时，将RGD(YGRGDSP)多肽连接于作为组织工程瓣膜/血管支架的去细胞异种瓣膜/血管支架的胶原和弹性蛋白上，可以使YGRGDSP多肽均匀牢固的分布于整个去细胞瓣膜支架，以增强种子细胞和支架的粘附能力、刺激细胞增殖。但是这种方式不仅步骤复杂，且需要对瓣膜进行化学处理，不适用于人体心脏瓣膜的细胞接种。专利号为ZL201720600607.2的专利通过在恒温箱内的设置细胞反应器，恒温箱内固定有驱动电机，通过驱动电机可驱动细胞反应器转动，使接种细胞均匀分散在细胞反应器内，并扰动细胞反应器内的营养液和细胞，使细胞在细胞反应器内均匀分布，以防止细胞接触抑制现象的发生。但是这种设备只能实现细胞的均匀分布，无法实现细胞的动态加压，体外培养的组织工程瓣膜难以长出完整的细胞层，并且细胞与支架的连接松散，仅限于表面连接，一旦植入人体，细胞大部分会被人体内的体液循环冲走，起不到应有的作用。

发明内容：

(一)解决的技术问题

本发明专利旨在提供一种动态加压组织工程瓣膜细胞接种器的使用方法，用于人体心脏组织工程瓣膜细胞接种，解决现有技术中，进行体外培养的组织工程瓣膜细胞与支架的连接松散，植入人体后细胞容易会被人体内的体液循环冲走，起不到应有作用的问题。

(二)技术方案：

为解决上述技术问题，本发明专利采用如下技术方案：一种动态加压组织工程瓣膜细胞接种器，包括上基座、上盖、下基座、下盖和瓣膜夹具，所述上基座内设有上部液室，所述下基座内设有下部液室，所述上盖内设有上部气室，所述下盖内设有下部气室，所述上盖与所述上基座连接，所述上部气室和所述上部液室之间设有上部隔膜，所述下盖与所述下基座连接，所述下部气室和所述下部液室之间设有下部隔膜，所述瓣膜夹具设置在所述上部液室内，所述上基座和所述下基座通过卡扣连接，所述上部液室与所述下部液室连通，所述上基座上设有与所述上部液室连通的上注液口和上排气口，所述上盖上设有与所述上部气室连通的上注气口，所述下基座上设有与所述下部液室连通的下注液口和下排气口，所述下盖上设有与所述下部气室连通的下注气口。