[发明专利]基于二维扩增阵列模式的瞬时识别急性肾损伤发展进程的传感器、制备方法及用途和用法有效
| 申请号: | 202010854955.9 | 申请日: | 2020-08-21 |
| 公开(公告)号: | CN111948185B | 公开(公告)日: | 2023-03-21 |
| 发明(设计)人: | 余伯阳;田蒋为;张然;喻谢安 | 申请(专利权)人: | 中国药科大学 |
| 主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64;G01N33/68 |
| 代理公司: | 南京苏高专利商标事务所(普通合伙) 32204 | 代理人: | 冒艳 |
| 地址: | 211198 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 基于 二维 扩增 阵列 模式 瞬时 识别 急性 损伤 发展 进程 传感器 制备 方法 用途 用法 | ||
1.一种基于二维扩增阵列模式的瞬时识别急性肾损伤发展进程的传感器,其特征在于:包括聚多巴胺-聚乙烯亚胺(PDA-PEI)共聚物和修饰了三种不同发射波长荧光团的DNA链,
所述的基于二维扩增阵列模式的瞬时识别急性肾损伤发展进程的传感器的制备方法,包括如下步骤:
(1)聚多巴胺-聚乙烯亚胺(PDA-PEI)共聚物载体的制备:将盐酸多巴胺和聚乙烯亚胺加入到缓冲液中,在室温下避光搅拌后过滤,透析以除去未反应的盐酸多巴胺和聚乙烯亚胺得到聚多巴胺-聚乙烯亚胺(PDA-PEI)共聚物载体;
(2)传感器的构建:将聚多巴胺-聚乙烯亚胺(PDA-PEI)共聚物载体与修饰了三种不同发射波长荧光团的DNA链混合即得PDA-PEI/DNAs传感器,所述修饰了三种不同发射波长荧光团的DNA链分别为AAAAA-Cy7,AAAAAAAAAA-Texas Red和AAAAAAAAAAAAAAAAAAAA-VIC,
所述AAAAA-Cy7,AAAAAAAAAA-Texas Red和AAAAAAAAAAAAAAAAAAAA-VIC激发波长和发射波长分别为735 nm,755 nm ;590 nm,615 nm;535nm,555nm,
所述聚乙烯亚胺的重均分子量为600Da-10000 Da。
2.权利要求1所述的基于二维扩增阵列模式的瞬时识别急性肾损伤发展进程的传感器在评价不同模型肾损伤的发展进程和药物对肾损伤不同阶段保护的作用机制和试剂中的用途。
3.权利要求1所述的基于二维扩增阵列模式的瞬时识别急性肾损伤发展进程的传感器的使用方法,收集不同模型肾损伤的尿液,加入传感器,瞬时测定三个信号分子的荧光光谱,形成特征荧光指纹,识别急性肾损伤发展进程。
4.根据权利要求3所述的使用方法,将收集的尿液过50 kDa超滤管,超滤离心得到不同分子量的尿液样本,分别加入传感器,瞬时测定分子量低于50 kDa的尿液诱导三个信号分子和分子量高于50 kDa的尿液诱导三个信号分子,基于分子量大小和所带电荷大小两个维度诱导产生的六个信号分子,借助多元统计分析方法,建立线性判别函数,定量识别不同模型急性肾损伤的发展进程。
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