[发明专利]一种检测尿酸及尿酸氧化酶的电化学方法及其应用

权利要求书

1.一种检测尿酸及尿酸氧化酶的电化学方法，其特征在于，具体步骤如下：

(1)GSH-Ag(I)复合物的制备

依次取1～10μL浓度为0.1～20mM的硝酸银水溶液、1～10μL浓度为0.1～20mM谷胱甘肽水溶液，混合均匀后加入磷酸缓冲溶液配成50～120μL的溶液，将溶液在25～40℃下缓缓震荡8～17min，即得到GSH-Ag(I)复合物，使用前将该复合物溶液与50～120μL0.02％wtNafion溶液混合均匀，静置5～20min；

(2)电化学生物传感器的制备

a.将玻碳电极GCE在麂皮上依次用粒径0.3μm、0.05μm的三氧化二铝粉末抛光0.5～5min，抛光后将电极置于超声清洗器中用超纯水超声清洗1～5min，然后用N₂吹干，记为GCE；

b.利用循环伏安法，设置电位范围为-1.2～0.5V、扫速5～20mV/s， 将0.5～2mg/mL石墨烯GO分散液电沉积到裸玻碳电极上得到GO/GCE；然后用取5～15μL步骤(1)中溶液滴涂于GO/GCE上，室温下静置20～60min，用超纯水缓缓冲洗电极，记为GSH-Ag(I)/GO/GCE；

(3)尿酸及尿酸氧化酶的分析检测

总体积为2mL的反应液，包括0～5mM的尿酸UA，0～2000U/L的尿酸氧化酶UOx，磷酸缓冲溶液，于25～45℃下反应2～10min，随后用于GSH-Ag(I)/GO/GCE的电化学响应检测。

2.根据权利要求1所述的电化学方法，其特征在于，在0.001～1mM范围内改变尿酸UA浓度，利用电流-时间法，设置电位为+0.4V，利用所制备电化学传感器对H₂O₂的电化学响应，在含有UOx反应液的电解质溶液中获得一系列不同浓度尿酸UA对应的电流大小，建立电流响应与尿酸UA之间的定量关系，根据两者之间的定量关系，确定待测样品中尿酸UA的含量。

3.根据权利要求2所述的电化学方法，其特征在于，电流响应对尿酸UA浓度线性相关方程为y＝53.47C_UA+0.01，r＝0.9939，线性范围为0.001～1mM，检测限为0.3μM。

4.根据权利要求1所述的电化学方法，其特征在于，在1～2000U/L范围内改变尿酸氧化酶UOx浓度，利用电流-时间法，设置电位为+0.4V，利用所制备电化学传感器对H₂O₂的电化学响应，在含有尿酸UA反应液的电解质溶液中获得一系列不同浓度尿酸氧化酶UOx对应的电流大小，建立电流响应与尿酸氧化酶UOx之间的定量关系，根据两者之间的定量关系，确定待测样品中尿酸氧化酶UOx的含量。

5.根据权利要求4所述的电化学方法，其特征在于，电流响应对尿酸氧化酶UOx浓度线性相关方程为y＝18.07lgC_UOx+0.05，r＝0.9980，线性范围为1～2000U/L，检测限为0.5U/L。