[发明专利]一种提高水产动物免疫力的益生菌饲料添加剂

权利要求书

1.一种提高水产动物免疫力的益生菌饲料添加剂，其特征在于所述添加剂的原料质量份数组成为：益生菌发酵菌粉20～30份、牡蛎粉30～50份、环糊精5～10份、维生素2～5份、褐藻多糖1～2份、复合酶制剂0～10份。

2.根据权利要求1所述的一种提高水产动物免疫力的益生菌饲料添加剂，其特征在于所述添加剂的原料质量份数组成为：益生菌发酵菌粉28份、牡蛎粉45份、环糊精6份、维生素3份、褐藻多糖1.8份、复合酶制剂8份。

3.根据权利要求1所述的一种提高水产动物免疫力的益生菌饲料添加剂，其特征在于所述益生菌包括酿酒酵母、芽孢杆菌和乳杆菌的混合菌剂；所述酿酒酵母购于广东省微生物菌种保藏中心，编号为GDMCC2.167。

4.根据权利要求3所述的一种提高水产动物免疫力的益生菌饲料添加剂，其特征在于所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和短小芽孢杆菌中的一种或几种的混合菌剂；所述枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和短小芽孢杆菌均够自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；编号分别为CGMCC1.2163、CGMCC1.0809和CGMCC1.3533。

5.根据权利要求3所述的一种提高水产动物免疫力的益生菌饲料添加剂，其特征在于所述乳杆菌为干酪乳杆菌，够自中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；编号分别为CGMCC1.159。

6.根据权利要求1所述的一种提高水产动物免疫力的益生菌饲料添加剂，其特征在于所述所述益生菌发酵菌粉的制备工艺具体包括如下步骤：

（1）发酵液制备：按照质量百分比麸皮2%、豆粕2%、蛋白胨1%、玉米浆1%、磷酸二氢钾0.02%、磷酸氢二钾0.01%、硫酸镁0.02%、氯化钙0.01%，余量比为水的比例配制液体发酵液，调节pH至6.5～7.0；

（2）好氧发酵：接种酿酒酵母和芽孢杆菌种子液，接种量分别为1～2%、2～4%，控制发酵温度28～37℃，转速150～300rpm；在此发酵条件下发酵12～24h；

（3）厌氧发酵：好氧发酵结束后，接种乳杆菌菌粉，接种量为2～4%，发酵温度28～37℃，控温厌氧发酵12～24h；

（4）低温浓缩：厌氧发酵结束后对发酵液进行低温浓缩；

（5）吸附干燥：浓缩后用0.5～1.0倍质量比的麸皮吸附，在40～60℃鼓风干燥机中干燥，水分控制在8～10%，即得益生菌发酵菌粉。

7.根据权利要求6所述的一种提高水产动物免疫力的益生菌饲料添加剂，其特征在于所述芽孢杆菌种子液的制备工艺为：将活化后的芽孢杆菌接种至种子培养基，所述种子培养基的组分为：葡萄糖2%、蛋白胨2%、酵母膏1%、硫酸镁0.01%、硫酸锰0.003%，pH6.5～7.0，在温度28～37℃、转速150～3000rpm条件下,培养16～24h，要求种子液的有效活菌数≥10⁹cfu/mL；所述芽孢杆菌活化的工艺为：采用本领域常用培养基LB固体培养基，在温度28～37℃条件下,培养16～24h；所述酵母菌种子液制备方法为：在无菌操作条件下，从酵母菌YDP斜面上用接种环挑取两环菌种，接种到500mL装300mLPDA液体培养基的三角瓶内，28℃～32℃，140r/min振荡培养24h后，然后按照上述工艺接种种子罐扩大培养制备酵母菌种子液，要求种子液的有效活菌数≥10⁹cfu/mL。

8.根据权利要求6所述的一种提高水产动物免疫力的益生菌饲料添加剂，其特征在于所述所述芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和短小芽孢杆菌中的混合菌剂，其接种比例为1:2:1。

9.根据权利要求1所述的一种提高水产动物免疫力的益生菌饲料添加剂，其特征在于所述复合酶制剂为淀粉酶、甘露聚糖酶、纤维素酶中的一种或几种的混合物；最优的，所述复合酶制剂为淀粉酶、甘露聚糖酶、纤维素酶的混合物，其质量比为3:1:2。

10.根据权利要求1所述的一种提高水产动物免疫力的益生菌饲料添加剂，其特征在于所述益生菌饲料添加剂的制备方法具体包括如下步骤：

（1）制备牡蛎粉颗粒，先将牡蛎壳粉进行超声震荡，分别形成40～80nm的颗粒；

（2）将牡蛎粉加入质量比10倍的去离子水，然后加入环糊精，搅拌分散均匀，得到牡蛎粉与环糊精的混合溶液；

（3）将益生菌发酵菌粉、维生素、褐藻多糖、复合酶制剂按比例加入到牡蛎粉与环糊精的混合溶液；

（4）混合后在60～65℃下加热、超声振荡1～2h后，冷却、过滤、低温真空烘干，得到提高水产动物免疫力的益生菌饲料添加剂。