[发明专利]可溶性胰岛素受体作为二型糖尿病检测生物标记物

说明书

本发明涉及可溶性胰岛素受体作为二型糖尿病检测生物标记物。本发明提供用于检测可溶性胰岛素受体(sINSR)的试剂在制备检测剂中的用途，所述检测剂用于检测受试者的二型糖尿病或二型糖尿病与认知障碍共患疾病。本发明还提供用于检测可溶性胰岛素受体(sINSR)的试剂在制备检测剂中的用途，所述检测剂用于区分二型糖尿病认知障碍与其他类型的认知障碍。本发明的检测剂能够准确检测二型糖尿病并且能够特异性的鉴别二型糖尿病相关的认知障碍。

技术领域

本发明涉及医学和生物学领域，特别涉及基于外周血的用于检测二型糖尿病以及二型糖尿病与认知障碍共患的标志物以及其检测方法和应用。

背景技术

糖尿病尤其是二型糖尿病是一种高发的老年疾病。据流行性病学数据显示二型糖尿病的全球病患数目巨大且成指数型增长。二型糖尿病的主要表现为胰岛素抵抗，机体中对于胰岛素应答的机制丧失进而导致糖脂代谢异常以及炎症的发生。最近临床及基础研究表明认知障碍是糖尿病的重要并发症，一度被认为是仅次于阿尔兹海默症(AD)以及血管性痴呆之后第三大痴呆的典型代表。虽然关于二型糖尿病引发的认知障碍的可能性机制包括胰岛素抵抗以及脑血管损伤，但其具体的致病机制尚未明确。致使临床上关于二型糖尿病相关的认知障碍疾病发展的研究及其靶向性诊断与治疗变得更加复杂，同时也为二型糖尿病相关的认知障碍有别于其他疾病所导致的认知障碍的鉴别带来困难。因此寻找监测二型糖尿病相关的认知障碍发展的生物标记物既为临床制定针对性的治疗和诊断战略提供新的方向，也为该疾病的有效性预防提供理论基础。

BACE1(β-site APP cleaving enzyme，β分泌酶)因过度剪切β-淀粉样前体蛋白(APP)产生病理性聚集的A-beta进而加剧AD病程的发展而被广泛研究。近年来随着BACE1底物的陆续发现，BACE1被认为在更多的组织器官发挥着生理与病理作用。最近越来越多的证据显示BACE1促进了胰岛素抵抗并且参与到糖尿病的发病进程中。但其中的具体机制尚未明确。

值得一提的是，最近在小鼠的肝脏细胞中发现BACE1通过剪切INSR的β亚基并且释放可溶性胰岛素受体(sINSR)从而降低细胞膜上的INSR水平，由此加剧胰岛素抵抗的发生。结合二型糖尿病的典型特征就是对胰岛素应答机制的丧失所导致的胰岛素抵抗。

发明内容

发明人进行了深入研究，尝试从sINSR的蛋白水平的变化来评估二型糖尿病以及二型糖尿病相关认知障碍。基于BACE1对INSR的剪切作用可能参与二型糖尿病及其相关的疾病发生过程，发明人设计一种通过检测血浆中sINSR的方法用于预测及诊断二型糖尿病和二型糖尿病与认知障碍共患。

因此，为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一个基于外周血的检测二型糖尿病及二型糖尿病与认知障碍共患的生物标志物。

为了实现本发明目的，本发明首先发现在二型糖尿病患者、二型糖尿病和认知障碍共患的患者相比较正常人的血浆中BACE1蛋白水平以及对INSR的酶切活性显著上调。

进一步地，利用免疫共沉淀及免疫印迹法、酶联免疫吸附测定法检测出在二型糖尿痫患者和二型糖尿痫和认知障碍共患的患者血浆中可溶性胰岛素受体含量异常升高，同时sINSR的含量的提高与BACE1蛋白含量以及与针对合成的INSR荧光多肽的BACE1酶活性呈显著正相关。值得一提的是，血浆sINSR的含量与二型糖尿病相关的诊断指标具有显著相关性。

利用Luminex多因子检测技术检测出Aβ40以及Aβ42/40的比值只在认知障碍患者(包括单纯认知障碍患者以及二型糖尿病和认知障碍共患的患者)而非单纯二型糖尿病患者中显示出差异，并且无法鉴别二型糖尿病相关认知障碍与其他类型的认知障碍的差别。

更进一步地，本发明利用ROC分析对已检测的标记物进行疾病预测，发现sINSR含量对于二型糖尿病有准确的预测并且能够很好地区分二型糖尿病相关的认知障碍与其他类型的认知障碍的差别，提示检测血浆中的可溶性胰岛素受体可以作为一个新型且准确检测二型糖尿病及二型糖尿病相关的认知障碍生物标志物。