[发明专利]一种咔唑类荧光衍生试剂的设计合成及其在氟虫腈和氟虫腈代谢物检测中的应用

权利要求书

1.一种咔唑类荧光衍生试剂，其特征在于，包括4-(2-(9-乙基-9H-咔唑-3-基)-1H-菲并[9,10-d]咪唑-1-基)丁酸，其结构式如下图式(I)所示：

2.根据权利要求1所述的一种咔唑类荧光衍生试剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)甲酰化反应：将式(II)化合物9-乙基咔唑与三氯氧磷进行反应，制备得到中间体式(Ⅲ)化合物，其反应式如下：

(2)环合反应：将中间体式(Ⅲ)化合物与式(Ⅳ)化合物菲醌反应，制备得到中间体式(Ⅴ)化合物，其反应式如下：

(3)卤代反应：中间体式(Ⅴ)化合物与式(Ⅵ)化合物4-溴丁酸乙酯反应，制备得到式(Ⅶ)化合物，反应式如下：

(4)水解反应：式(Ⅶ)化合物与氢氧化钠反应，制备得到式(I)化合物，反应式如下：

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(1)所述反应的反应溶剂为DMF，反应温度为98℃。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(2)所述反应的溶剂为冰醋酸，加入乙酸铵，反应温度为130℃。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(3)所述反应的溶剂为DMF，催化剂为碳酸铯，反应温度为48℃。

6.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，步骤(4)所述反应的溶剂为甲醇水溶液，加入氢氧化钠，反应温度为30℃。

7.根据权利要求1所述的一种咔唑类荧光衍生试剂在检测氟虫腈及其代谢物中的应用。

8.根据权利要求7所述的一种咔唑类荧光衍生试剂在检测氟虫腈及其代谢物中的应用，其特征在于，具体为：采用基于咔唑类荧光衍生试剂建立的柱前衍生化检测氟虫腈及其代谢物的HPLC-FLD方法。

9.根据权利要求8所述的一种咔唑类荧光衍生试剂在检测氟虫腈及其代谢物中的应用，其特征在于，所述基于咔唑类荧光衍生试剂建立的柱前衍生化检测氟虫腈的HPLC-FLD方法包括：

柱前衍生化具体为：DCC/DMAP为催化缩合剂，二氯甲烷为溶剂，氟虫腈与荧光衍生试剂的摩尔浓度比为1:11，55℃水浴反应60min；

HPLC-FLD主要检测条件为：C₁₈色谱柱；等度洗脱；流动相：乙腈/水＝85:15；流速：1.0mL/min；λ_ex＝310nm，λ_em＝398nm；进样量10μL；柱温40℃。

10.根据权利要求8所述的一种咔唑类荧光衍生试剂在检测氟虫腈及其代谢物中的应用，其特征在于，所述基于咔唑类荧光衍生试剂建立的柱前衍生化检测氟虫腈代谢物的HPLC-FLD方法包括：

柱前衍生化具体为：EDC/DMAP为催化缩合剂，二氯甲烷为溶剂，氟虫腈代谢物与咔唑类荧光衍生试剂的摩尔浓度比为1:8，在45℃水浴中反应75min；

主要检测条件为：C₁₈色谱柱；等度洗脱；流动相：乙腈/水＝80:20；流速：1.0mL/min；λ_ex＝310nm，λ_em＝404nm；进样量20μL；柱温40℃。