[发明专利]一种重组IL-15融合蛋白及其应用

说明书

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种重组IL‑15融合蛋白及其应用。本发明提供的重组IL‑15融合蛋白包括白细胞介素‑15、白细胞介素‑15受体α的Sushi结构域和抗人血清白蛋白纳米抗体；所述的白细胞介素‑15、白细胞介素‑15受体α的Sushi结构域和抗人血清白蛋白纳米抗体直接连接或通过连接肽间接连接。所述的重组IL‑15融合蛋白可以与人血清白蛋白结合，同时可以在低剂量的浓度下有效激活T细胞，使免疫系统发挥作用，达到预防和治疗肿瘤的目的。

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种重组IL-15融合蛋白及其应用。

背景技术

细胞因子，例如淋巴因子、趋化因子和生长因子，是由包括淋巴细胞、单核细胞在内的多种类型的细胞产生，在人类生理和疾病控制中有广泛的作用。这几类细胞因子在临床上证明能够有效的治疗多种疾病。例如白细胞介素（interleukin，IL）是由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子，其在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。

其中，白细胞介素-15（IL-15）属于四个小α螺旋束细胞因子家族中的成员。IL-15需通过与其受体结合发挥生物学活性。IL-15受体由三个受体亚基组成：IL-15受体α（IL-15Rα）、IL-2受体β（IL-2Rβ，也称IL-15Rβ或CD122）和γc（也称CD132）。IL-15Rα内含一个Sushi结构域，能与IL-15结合，并且是使结合后的IL-15发挥生物学功能所必需的。IL-15具有广泛的免疫调节活性，能够参与调节多种免疫细胞的存活、增殖与功能，其中包括NK细胞、记忆性CD8+T细胞、NKT细胞等。

天然IL-15在治疗过程中必须经常以高剂量施用，由于毒性而限制其效用。IL-15半衰期大略为给药后1小时，且必须每天给药进行治疗。通过基因工程的方式开发含有人抗体Fc片段的融合蛋白是一种常用的增加蛋白半衰期的方式。专利CN108341884A中公开了一种免疫因子，包括白细胞介素15或其衍生物的氨基酸序列的多肽、IL-15Rα的sushi结构域或其衍生物的氨基酸序列的多肽、直接地或间接地共价连接至所述缀合物的抗体或所述抗体的片段，能延长IL-15的半衰期，增强免疫效果。在专利CN108463239A中，利用IL-15的突变体IL-15N72D与IL-15受体的片段融合形成的IL-15Rα Sushi-Fc在共表达的情况下形成含有人Fc片段的四聚体融合蛋白，用于延长IL-15的半衰期，IL-15的超激动剂突变体（IL-15N72D）增加IL-2Rβ结合能力（比原生IL-15高4至5倍），并已经被认定用于治疗性用途。在专利CN106459219B中，通过突变改造额外引入二硫键的方式获得含有人Fc片段的IL-15及其受体IL-15Rα Sushi融合蛋白。专利CN102145178A、CN108472324A和NektarTherapeutics公司利用PEG化技术对IL-15蛋白进行修饰，降低修饰后的蛋白在体内的清除速率，达到长效使用的目的。但是，PEG化对工艺的要求很高，同时PEG化存在不能定点对目的蛋白进行PEG化、PEG化后的蛋白活性下降等问题。因此，仍然需要采用新的融合方式开发新型的IL-15融合蛋白。

发明内容

针对现有技术存在的不足，本发明要解决的技术问题是以抗人血清白蛋白纳米抗体为基础，构建了一种新型重组IL-15融合蛋白，该重组IL-15融合蛋白可以与人血清白蛋白进行高亲和力结合并显示出优异的T细胞激活效应，可用于肿瘤预防和治疗。

术语：