[发明专利]一种胶体金免疫层析试纸金标垫和样品垫的处理液及处理方法有效
申请号: | 202010626837.2 | 申请日: | 2020-07-01 |
公开(公告)号: | CN111638327B | 公开(公告)日: | 2023-10-13 |
发明(设计)人: | 叶成栋;刘军;罗春勤 | 申请(专利权)人: | 成都赛普克生物科技股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/558 | 分类号: | G01N33/558;G01N33/531;G01N33/53 |
代理公司: | 成都巾帼知识产权代理有限公司 51260 | 代理人: | 邢伟 |
地址: | 610000 四川*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 胶体 免疫 层析 试纸 金标垫 样品 处理 方法 | ||
本发明公开了一种胶体金免疫层析试纸金标垫和样品垫的处理液及处理方法,所述处理液包括磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、蔗糖、tween‑20和表面活性剂;处理方法包括材料选择、预处理、润湿和烘干。经本发明处理液和方法处理的试纸条加样本和/或缓冲液后,金颗粒迅速均匀释放,并且释放完全,无任何残留;检测后本底干净、洁白,有助于阴性和阳性的区别判定;提高了产品的阳性检出率;金标结合物稳定性有极大提高,组装的试纸条稳定性相应提高。
技术领域
本发明涉及一种胶体金免疫层析试纸金标垫和样品垫的处理液及处理方法,属于免疫层析检测技术领域。
背景技术
胶体金免疫层析法(ColloidalGoldImmunochromatographyAssay,GICA)是一种将抗原抗体特异性反应通过胶体金标记和免疫层析表现出来的一种快速检测方法,该方法与传统的血清学检测和PCR等分子生物学方法相比具有快速、简便、无需特殊实验设备、结果可靠等优势。
金标垫和样品垫是胶体金免疫层析试纸的重要组成部分,样品垫在使用前一般需要通过样品垫处理液进行处理,由于检测样本及项目的不同,不处理或使用常规的样品垫处理液应用于检测时,存在较大的问题,例如:出现假阳性和假阴性反应、阴阳性对比度不高、不能有效的促进金标结合垫中的金颗粒释放等。金标垫的主要作用是吸附标记有相应蛋白的胶体金颗粒,常用材料有聚酯膜。金标垫决定了标记有相应蛋白的胶体金颗粒的活性(包括灵敏度和特异性)、释放效果以及长期的稳定性,因此对胶体金免疫层析试纸的效果影响很大。目前金标结合垫的制备方法多为直接将标记好的浓缩的金颗粒喷涂或浸泡到聚酯膜上。或将聚酯膜通过常规的处理液浸泡处理后,再将标记好的浓缩的金颗粒喷涂或浸泡到聚酯膜上。但是使用过程中发现,该方法制备的金标结合垫在检测过程中释放慢且不完全,影响检测结果的准确性和灵敏度等。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺点,提供一种胶体金免疫层析试纸金标垫和样品垫的处理液;
本发明的另一目的提供一种胶体金免疫层析试纸金标垫和样品垫的处理方法。
本发明的目的通过以下技术方案来实现:一种胶体金免疫层析试纸金标垫和样品垫的处理液,它包括以下原料:
磷酸氢二钠:0.5~1.0%,磷酸二氢钾:0.05~0.1%,蔗糖:1~3%,tween-20:0.5~1mL/L,表面活性剂:1~2mL/L。其中,处理对象为金标垫时,表面活性剂为S6;处理对象为样品垫时,表面活性剂为S6和S9的混合溶液。
作为优选方案,它包括以下原料:
磷酸氢二钠:0.58%,磷酸二氢钾:0.052%,蔗糖:1.0%,tween-20:0.5mL/L,表面活性剂:1.0mL/L。其中,处理对象为金标垫时,表面活性剂为S6;处理对象为样品垫时,表面活性剂为S6和S9的混合溶液。
一种胶体金免疫层析试纸金标垫和样品垫的处理方法,它包括以下步骤:
S1.材料选择:选择未经较多或特殊处理的普通型玻璃纤维素膜和聚酯膜;
S2.预处理:对玻璃纤维素膜,将玻璃纤维素膜放置烘箱中充分烘干;对聚酯膜,先在纯化水中浸泡1.5~2.5h,浸泡后甩掉水分并放置在烘箱中充分烘干;其中,所述烘箱的烘干温度为110~130℃;
S3.润湿:用移液器将上述的处理液均匀的涂布在预处理后的玻璃纤维素膜和聚酯膜上,刚刚润湿即可;
S4.烘干:润湿后的玻璃纤维素膜和聚酯膜移至烘箱,在75~85℃温度下烘干,玻璃纤维素膜作样品垫待用,聚酯膜作金标垫待用。
进一步地,步骤S1中所述聚酯膜在纯化水的浸泡过程中换水两次。
一种胶体金试纸条,采用以下方法制备:
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