[发明专利]滋肾育胎丸的指纹图谱构建方法及检测方法

说明书

本发明涉及一种滋肾育胎丸的指纹图谱构建方法及检测方法。所述指纹图谱构建方法包括如下步骤：制备对照品溶液和供试品溶液，其中，制备所述供试品溶液的步骤包括：取滋肾育胎丸供试品，加溶剂进行提取，收集提取液，得所述供试品溶液；以液相色谱法检测所述对照品溶液和供试品溶液；所述液相色谱法采用的洗脱条件为：以体积浓度0.05～2％的甲酸水溶液作为流动相A，乙腈作为流动相B，进行梯度洗脱。该指纹图谱构建方法能够构建获得特征峰包含续断、菟丝子、人参、枸杞子、制何首乌、白术、艾叶等多味药材的有效成分的指纹图谱，能够更全面地反应滋肾育胎丸整体化学成分，提高滋肾育胎丸质量控制的准确性和全面性。

技术领域

本发明涉及中药检测技术领域，特别是滋肾育胎丸的指纹图谱构建方法及检测方法。

背景技术

滋肾育胎丸由熟地黄、枸杞子、菟丝子、砂仁、人参、桑寄生、阿胶(炒)、(制)首乌、艾叶、巴戟天、白术、党参、鹿角霜、续断、杜仲等15味中药组成。为中医妇科专家罗元恺教授在张锡纯寿胎丸的基础上，经过多年的临床实践创制而成。功能主治滋补肝肾，益气培元，养血安胎，强壮身体，用于脾肾两虚，冲任不固所致的滑胎(防治习惯性流产和先兆性流产)。

由于滋肾育胎丸的药味较多，成分复杂，质量控制有一定的难度。其现有标准为卫生部标准，没有含量测定项，也缺乏总体的控制手段。另外，目前已有的关于滋肾育胎丸的指纹图谱研究，所建立的指纹图谱色谱峰少，且基本来源于续断(如绿原酸、马钱苷、当药苷、马钱苷酸、川续断皂苷Ⅵ)，只能反映滋肾育胎丸中小部分的成分特征，不能全面地反映药物的整体成分情况，不利于滋肾育胎丸质量控制的准确性和全面性。

发明内容

基于此，有必要提供一种滋肾育胎丸的指纹图谱构建方法。该指纹图谱构建方法能够构建获得特征峰包含续断、菟丝子、人参、枸杞子、制何首乌、白术、艾叶等多味药材的有效成分的指纹图谱，该指纹图谱更具有指纹特性，能够更全面地反应滋肾育胎丸整体化学成分，提高滋肾育胎丸质量控制的准确性和全面性。

具体技术方案如下：

一种滋肾育胎丸的指纹图谱构建方法，包括如下步骤：

制备对照品溶液和供试品溶液，其中，

制备所述对照品溶液的步骤包括：取绿原酸、当药苷、马钱苷、紫云英苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、川续断皂苷VI、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd、大黄酚、大黄素甲醚和β-胡萝卜素对照品，加溶剂溶解，得所述对照品溶液；

制备所述供试品溶液的步骤包括：取滋肾育胎丸供试品，加溶剂进行提取，收集提取液，得所述供试品溶液；

以液相色谱法检测所述对照品溶液和供试品溶液；

所述液相色谱法采用的洗脱条件为：以体积浓度0.05～2％的甲酸水溶液作为流动相A，乙腈作为流动相B，进行梯度洗脱。

在其中一个实施例中，所述梯度洗脱的过程包括：

0～10min，保持流动相B的体积百分比为5％；

10～20min，流动相B的体积百分比由5％升高至10％；

20～40min，流动相B的体积百分比由10％升高至25％；

40～60min，流动相B的体积百分比由25％升高至30％；

60～75min，流动相B的体积百分比由30％升高至40％；

75～90min，流动相B的体积百分比由40％升高至75％；

90～120min，流动相B的体积百分比由75％升高至90％；

120～140min，流动相B的体积百分比由90％升高至100％；