[发明专利]一种筛选可预防和/或治疗骨质疏松的药物的方法

说明书

本发明公开了一种筛选可预防和/或治疗骨质疏松的药物的方法，属于微生物技术领域以及医药技术领域。本发明提供了一种筛选可预防和/或治疗骨质疏松的药物的方法，此方法仅需先将经肿瘤坏死因子α(TNF‑α)处理的人结肠癌上皮细胞Caco‑2在添加有待筛选药物的细胞培养液中进行孵育，得到经孵育的骨质疏松细胞模型，然后检测经孵育的骨质疏松细胞模型跨膜阻力的相对变化，即可筛选得到可预防和/或治疗骨质疏松的药物，具有操作简单、实验周期短、成本低等优势，适合大规模筛选使用。

技术领域

本发明涉及一种筛选可预防和/或治疗骨质疏松的药物的方法，属于微生物技术领域以及医药技术领域。

背景技术

骨质疏松(osteoporosis)是一种骨代谢疾病，是指以单位体积内骨量低于正常为特征的骨骼疾病，主要表现为骨量下降、骨微观结构退化、骨脆性增加、易发生骨折等。骨质疏松最大的危害是骨质疏松性骨折，骨质疏松性骨折会引发疼痛，严重降低骨质疏松患者的生活质量，并且，骨质疏松性骨折在严重的情况下可致残，使患者活动受限、生活不能自理，给个人、家庭和社会带来沉重的精神和经济负担。

目前，临床上用于治疗骨质疏松的药物主要包括双膦酸盐、阿仑膦酸、选择性雌激素受体调节剂和激素替代剂等，这些药物能够有效的促进成骨细胞的形成，抑制破骨细胞的形成，在治疗骨质疏松症上具有较好的临床疗效。可是，在使用这些药物治疗骨质疏松的过程中，有些药物存在的潜在并发症以及副作用也随之突显。例如，双膦酸盐可导致部分患者出现严重的骨、关节或肌肉不适，少数患者在患牙科疾病或接受侵入性牙科治疗时发生颌骨骨坏死的风险升高。阿仑膦酸的长期使用还与股骨粗隆下和股骨骨干骨折的发生有关。选择性雌激素受体调节剂雷洛昔芬可增加静脉血栓栓塞症和中风的风险。在激素替代治疗中，雌激素会增加子宫完整患者子宫内膜增生和患癌的风险，并且，雌激素可导致胆结石病和静脉血栓栓塞症的发病率增加2～3倍。因此，急需找到一种长期使用不会导致患者产生并发症以及副作用的可有效缓解骨质疏松的药物。

益生菌类药物是目前研究较为广泛的一种新型药物，近几年，已有多种益生菌被证实针对多种疾病具有极好的疗效，例如，康文全，付剑云等人发现了双歧杆菌可用于治疗便秘消化系统疾病(丽珠肠乐治疗慢传输性便秘临床疗效观察[J].中国中西医结合消化杂志，2003,11(6)：353-355)；Bernini等人发现了动物双歧杆菌可用于治疗II型糖尿病(Beneficial effects of Bifidobacterium lactis on lipid profile and cytokinesin patients with metabolic syndrome:A randomized trial.Effects of probioticson metabolic syndrome[J].Nutrition，2016，32(6):716-719.)。并且，益生菌类药物天然具有安全性高、不会引发并发症和副作用的优势，因此，筛选得到可有效缓解骨质疏松的益生菌类药物对克服现有的用于治疗骨质疏松的药物存在的缺陷十分关键。

现阶段，主要使用骨质疏松模型来完成可有效缓解骨质疏松的药物的筛选。骨质疏松模型主要有动物模型和细胞模型两种，骨质疏松细胞模型则主要有成骨细胞模型、破骨细胞模型以及成骨细胞和破骨细胞共培养模型三种。其中，骨质疏松动物模型实验操作复杂、实验周期长、费用高，不适合大规模筛选使用，并且，随着动物伦理要求的日益严格，未来使用实验动物将会更加困难；骨质疏松细胞模型则具有分离培养困难、制备过程复杂等缺陷。

因此，急需构建一种制备简单，并且，使用此骨质疏松细胞模型筛选可预防和/或治疗骨质疏松的药物时，具有操作简单、实验周期短、成本低的优势的骨质疏松细胞模型。

发明内容

[技术问题]

本发明要解决的技术问题是提供一种制备简单，并且，使用此骨质疏松细胞模型筛选可预防和/或治疗骨质疏松的药物时，具有操作简单、实验周期短、成本低的优势的骨质疏松细胞模型。

[技术方案]