[发明专利]一种体外模拟人体肠道菌群发酵的设备及方法在审
申请号: | 202010582779.8 | 申请日: | 2020-06-23 |
公开(公告)号: | CN111733071A | 公开(公告)日: | 2020-10-02 |
发明(设计)人: | 刘月;董丽娜;吴长新;李建国;李建宽;张瑞;张升校;王家琦 | 申请(专利权)人: | 山西大学 |
主分类号: | C12M1/38 | 分类号: | C12M1/38;C12M1/36;C12M1/34;C12M1/26;C12M1/04;C12M1/02;C12M1/00;C12N1/20 |
代理公司: | 太原申立德知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 14115 | 代理人: | 郭海燕 |
地址: | 030006*** | 国省代码: | 山西;14 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 体外 模拟 人体 肠道 群发 设备 方法 | ||
1.一种体外模拟人体肠道菌群发酵的设备,其特征在于:包括有肠道菌群发酵系统、气路系统、温度调节系统、pH调节系统、搅拌系统和系统控制器,其中肠道菌群发酵系统包括发酵罐、罐盖和多联磁力搅拌器,所述罐盖装有pH仪,pH仪通过数据线与系统控制器连接;所述罐盖上设置有气体进出口、酸液进口、碱液进口以及取样口,所述气体进口通过铜管连接有气体存储罐;酸液进口连接蠕动泵,通过硅胶管与盐酸试剂瓶连接;碱液进口连接蠕动泵,通过硅胶管与碳酸氢钠试剂瓶连接;取样口通过硅胶管与注射器连接;所述发酵罐放在多联磁力搅拌器上,通过多联磁力搅拌器内部的转子搅拌发酵罐内的发酵液;所述气路系统为气罐及管线;所述温度调节系统为恒温培养箱,所述发酵罐及多联磁力搅拌器置于恒温培养箱中并且以模拟人体37℃恒温环境培养;所述pH调节系统为pH仪;所述搅拌系统为多联磁力;所述系统控制器包括人机交换界面和中央处理器,所述中央处理器通过数据线与多联磁力搅拌器、pH仪和蠕动泵连接。
2.一种体外模拟人体肠道菌群发酵的方法,其特征在于:具体包括有控制系统参数设置以及肠道菌群模拟发酵两大步骤,
其中:控制系统参数设置具体如下:系统温度37℃,发酵罐的pH通过0.05M盐酸和0.5M碳酸氢钠保持在一定范围参数内,若模拟小肠菌群发酵设置pH参数6.0~6.5之间、若模拟升结肠菌群发酵设置pH参数5.7~5.9之间、若模拟横结肠菌群发酵设置pH参数6.3~6.5之间、若模拟降结肠菌群发酵设置pH参数6.7~6.9之间,发酵模拟时间为0-48h,发酵罐中培养基体积135ml,粪便稀释液体积15ml;
其中:肠道菌群模拟发酵步骤如下:
第一步:开启恒温培养箱,设置温度37℃,使系统温度保持在37℃;
第二步:发酵罐内加入135ml培养基以及15ml制备好的10%粪便稀释液体积;
第三步:打开气罐,开启多联磁力搅拌器,开启pH调节系统使发酵罐内pH稳定在设置好的参数范围内,在模拟发酵过程中,通过控制注射器可定时采样。
3.根据权利要求2所述的一种体外模拟人体肠道菌群发酵的方法,其特征在于:所述10%粪便稀释液的制备步骤如下:取近3个月未接受抗生素治疗、未服用益生菌或益生元等功能食品的健康人的新鲜粪便,用0.1%蛋白胨溶液稀释成10%粪水悬液,通过拍打式无菌均质器4次/秒混匀,纱网过滤,取15ml粪便稀释液,加入发酵罐。
4.根据权利要求3所述的一种体外模拟人体肠道菌群发酵的方法,其特征在于:所述培养基中各组分的配比如下:蛋白胨:酵母提取物:氯化钠:磷酸氢二钾:磷酸二氢钾:七水硫酸镁:六水氯化钙:碳酸氢钠:吐温80:氯高铁血红素:维生素K:L-半胱氨酸HCL:猪胆盐之间的比例为:2:2:0.1:0.04:0.04:0.01:0.01:2:2:0.05:0.01:0.5:0.5。
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