[发明专利]一种利尿活性药物细胞筛选模型及其建立方法和应用

说明书

本发明涉及一种利尿活性药物细胞筛选模型及其建立方法和应用，该方法包括以下步骤：1)MDCK细胞的培养；2)药物的配制；3)NaCl转运浓度的筛选；4)分组、给药与NaCl转运实验；5)统计学分析。本方法采用肾小管细胞模拟氯化钠转运的模型，来筛选利尿活性药物，并在石韦提取单体利尿活性筛选实验证明行之有效，为较为快捷的细胞模型利尿药物筛选模型。

技术领域

本发明涉及药学领域，具体涉及一种利尿活性药物细胞筛选模型及其建立方法和应用。

背景技术

根据现有文献报道，药物筛选指的是采用适当的方法，对可能作为药物使用的物质(采样)进行生物活性、药理作用及药用价值的评估过程。药物筛选是生化水平和细胞水平的筛选。

筛选模型就是在药物筛选实验中所应用的药理实验模型，由于药物筛选要求实验方案有标准化和定量化的特征，因而在传统药理实验中常见的动物实验在药物筛选中较少应用，根据实验模型的不同，药物筛选可以分为生化水平的筛选和细胞水平的筛选。细胞水平的药物筛选是更接近生理条件的一种药物筛选模型，其模型是拟设计药物作用的靶细胞，应用细胞培养技术获取所需细胞，将这些细胞与候选化合物相互作用，通过与生化水平筛选类似的检测技术测定化合物的作用能力，从而对化合物进行筛选。

当各种疾病原因引起排尿困难时就会借助药物治疗，以解决排尿难的问题，但如何筛选利尿活性的药物是医药界普遍关注的难题。

传统筛选利尿活性药物没有有效快捷的方法，如公开的文献：叶潇等，川木通对大鼠利尿作用及其物质基础研究[J].中国中药杂志,2019,44(09):1889-1894。郭林新等，三叶木通利尿活性部位筛选及其化学成分[J].中国实验方剂学杂志,2017,23(03):66-70。上述动物水利尿模型筛选方法成本较高，时间较长，不易操作。

为寻找时间周期短、成本较低的快捷的利尿药物筛选方法，本发明采用肾小管细胞模拟氯化钠转运的模型，来筛选利尿活性药物。并在石韦提取单体利尿活性筛选实验证明行之有效，为较为快捷的细胞模型利尿药物筛选模型。

发明内容

本发明的目的是提供一种利尿活性药物细胞筛选模型的建立方法。

本发明的目的是提供一种利尿活性药物细胞筛选模型。

本发明的另一目的是提供的建立方法获得的模型在利尿活性药物中的应用。

本发明所述的一种利尿活性药物细胞筛选模型的建立方法包括以下步骤：1)MDCK细胞的培养；2)药物的配制；3)NaCl转运浓度的筛选；4)分组、给药与NaCl转运实验；5)统计学分析。

本发明所述建立方法中的MDCK细胞的培养具体为：购买MDCK细胞株，用含5～15％胎牛血清、0.5～1.5％青霉素-链霉素溶液、85～95％的DMEM高糖培养基，37℃、CO₂培养箱MDCK细胞培养至对数生长期。

优选的，本发明所述建立方法中的MDCK细胞的培养具体为：购买MDCK细胞株，用含10％胎牛血清、1％青霉素-链霉素溶液、89％的DMEM高糖培养基，37℃、CO₂培养箱MDCK细胞培养至对数生长期；