[发明专利]重楼皂苷I在肿瘤多药耐药逆转剂中的应用

说明书

本发明公开了一种重楼皂苷I在肿瘤多药耐药逆转剂中的应用，重楼皂苷I用作肿瘤多药耐药逆转剂时能够改善细胞膜的通透性，使不透性染料和化疗药物进入肿瘤细胞内，方便对肿瘤细胞的生命周期进行观察，增强化疗药物的作用效果，进而抑制肿瘤细胞增殖和肿瘤恶化。

技术领域

本发明属于医药技术领域，涉及一种重楼皂苷I在肿瘤多药耐药逆转剂中的应用。

背景技术

药物透过细胞膜进入细胞是药物起效的重要条件，然而除小分子、脂溶性(非极性)物质以外的大分子物质和极性物质进入细胞，一般都需要膜上的蛋白载体作用，肿瘤耐药细胞膜上的药物外排蛋白高表达，使得药物难以进入细胞发挥作用；现有的耐药逆转剂多为外排蛋白的抑制剂，比如维拉帕米，但由于其毒性较大，很难用于临床；其他表面活性剂(破膜剂)，如皂素和吐温等，由于自身毒性或其他问题，目前尚未作为肿瘤耐药逆转剂应用以增加膜通透性，现有的肿瘤耐药逆转剂或破膜剂多为化学合成品，毒性较大，应用受限。

发明内容

本发明的目的在于提供一种重楼皂苷I在肿瘤多药耐药逆转剂中的应用，重楼皂苷I为中药提取物，来源广泛且安全性高，在其低细胞毒浓度下能够提高肿瘤细胞膜的通透性，使抗肿瘤药物在肿瘤细胞内的浓度增加，进而提高抗肿瘤药物的作用效果。

本发明所采用的技术方案是，重楼皂苷I在肿瘤多药耐药逆转剂中的应用，所述重楼皂苷I的结构式如式(1)所示：

进一步的，所述重楼皂苷I的低细胞毒浓度为0.3μmol/L、1μmol/L和3μmol/L。

进一步的，所述重楼皂苷I的低细胞毒浓度为3μmol/L。

进一步的，所述重楼皂苷I能与药物ADM、DDP、5-Fu联用。

进一步的，所述重楼皂苷I的制备过程如下：

S1，使用95％的乙醇将粉碎后的长柱重楼干燥根茎浸泡7天、过滤，重复过滤滤渣四次后合并滤液，回收乙醇溶剂得到浸膏；

S2，用水将浸膏制成混悬液，使用与水等体积的乙酸乙酯萃取三次，回收乙酸乙酯获得乙酸乙酯萃取部位，使用正丁醇萃取乙酸乙酯萃取部位，获得正丁醇萃取部位；

S3，使用硅胶柱层析正丁醇萃取部位，层析过程中使用氯仿-甲醇混合溶液梯度洗脱划段，得到Fr.A、Fr.B、Fr.C和Fr.D四个部分，其中氯仿-甲醇混合溶液的体积比依次为10：1，5：1，3：1和1：1；

S4，取Fr.B部分经C18反相硅胶柱层析，得到Fr.B1、Fr.B2、Fr.B3、Fr.B4、Fr.B5和Fr.B6六个部分；

反相硅胶柱层析时的洗脱剂是体积比为10：90→100：0的甲醇-水；

S5，使用半制备高效液相色谱纯化Fr.B5部分得到重楼皂苷I，所述半制备高效液相色谱仪型号为安捷伦1200，色谱柱为Zorbax SB-C18色谱柱，9.4×250mm，流动相是体积比为50：50的乙腈-水，流动相流速为2mL/min。

本发明的有益效果是：重楼皂苷I属于中药提取物，来源较为广泛，安全性高，用于肿瘤多药耐药逆转剂时对人体细胞的毒副作用较小，重楼皂苷I能够提高肿瘤细胞膜的通透性，使抗肿瘤药物在肿瘤细胞内的浓度增加，进而提高抗肿瘤药物的作用效果。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是阿霉素联合PPI作用于MCF-7细胞的阳染率比较图。