[发明专利]用于杂交瘤细胞的连续培养装置及培养方法

权利要求书

1.一种用于杂交瘤细胞的连续培养装置，包括中空纤维柱，所述中空纤维柱包括设置有壳程进口和壳程出口的壳体，所述壳体内并排设置有多根中空纤维丝，所述中空纤维丝的一端均与管程进口相连通，中空纤维丝的另一端均与管程出口相连通，其特征在于：还包括

内循环部，其包括与所述管程进口相连的第一管路，所述第一管路上设置有循环泵，第一管路伸入循环槽内，且第一管路的进口端靠近所述循环槽底板设置，循环槽内还设置有与所述管程出口相连的第二管路、以及带有第一空气过滤器的第一放空管；

供应部，其包括供应槽，所述供应槽内设置有与施压设备相连的施压管，所述施压管上设置有第二空气过滤器，供应槽内还设置有与所述壳程进口相连的供液管，所述供液管上设置有第一开关阀，供液管的入口端靠近供应槽的底板设置；

获取部，其包括收集槽，所述收集槽内设置有与所述壳程出口相连的收集管，所述收集管上设置有第二开关阀，收集槽内还设置有与抽取设备相连的抽压管、以及带有第三空气过滤器的第二放空管，所述抽压管的进口端靠近收集槽的底板设置。

2.一种基于权利要求1所述的用于杂交瘤细胞的连续培养装置的细胞培养方法，其特征在于：包括如下步骤：

第一步，高压灭菌后，在超净工作台上向循环槽和供应槽中注入无菌培养基，并通过施压设备将供应槽内的无菌培养基压入到中空纤维柱的壳程中，然后关闭第一、二开关阀，之后，启动循环泵使循环槽内的无菌培养基在中空纤维柱的管程中循环流动，接着，将中空纤维柱以倾斜姿态放至二氧化碳培养箱中并使其持续运行，上述中空纤维柱由管程进口向管程出口方向向上倾斜20-30°；

第二步，复苏杂交瘤细胞并进行放大培养，离心弃掉上清后，再使用新鲜培养基稀释细胞；然后关闭循环泵，打开第一、二开关阀，在超净工作台上将稀释后的细胞加入供应槽中，再通过施压设备将其压入到中空纤维柱的壳程中，之后，向供应槽内加入新鲜培养基备用，同时关闭第一、二开关阀、打开循环泵进行细胞培养；

第三步，细胞培养7-8天时，当看到中空纤维柱管程进口端出现成团细胞时，关闭循环泵，打开第一、二开关阀，通过施压设备将供应槽内的培养基压入到中空纤维柱的壳程内对成团细胞内含有的单克隆抗体上清进行置换，置换出的单克隆抗体上清进入收集槽后，关闭第一、二开关阀，然后通过抽取设备抽取单克隆抗体上清进行后续试验；

第四步，从第一次抽取单克隆抗体上清后，每天进行第三步的抽取操作，直到达到实验需求量的单克隆抗体为止；在此期间，每隔七天对循环槽和供应槽内的培养基进行一次更换。