[发明专利]含间充质干细胞分泌的活性因子提取物的美容护肤品以及护肤精华液的制备方法

权利要求书

1.一种含间充质干细胞分泌的活性因子提取物的美容护肤品，其特征在于，含有间充质干细胞分泌的活性因子提取物，bFGF碱性成纤维细胞生长因子、水溶性胶原蛋白、透明质酸、VE维生素E、海藻糖；

其中，所述间充质干细胞分泌的活性因子提取物、bFGF、水溶性胶原蛋白、透明质酸、VE、海藻糖的重量比为0.02ug-20ug：10ng-5000ng：0.01g-20g：0.01g-3g：0.01g-10g：0.01g-20g。

2.根据权利要求1所述的美容护肤品，其中，所述间充质干细胞分泌的活性因子提取物、bFGF、水溶性胶原蛋白、透明质酸、VE、海藻糖的重量比为0.05ug-5ug：500ng-2000ng：0.05g-8g：0.05g-1g：0.05g-1.2g：0.1g-8g。

3.根据权利要求1所述的美容护肤品，其中，所述间充质干细胞分泌的活性因子提取物通过以下方法获得：

1)将间充质干细胞原代细胞进行连续培养，获得P1代、P2代至P5代细胞；

2)收集P3代至P5代的培养液上清，获得间充质干细胞分泌的活性因子粗液；

3)将活性因子粗液进行离心处理，接着收集上清液，然后进行过滤以得到间充质干细胞分泌的活性因子提取物；

其中，间充质干细胞原代细胞为人脐带来源间充质干细胞原代细胞。

4.根据权利要求3所述的美容护肤品，其中，在步骤1)中，所述连续培养初始时细胞的密度为0.7×10⁴-1.3×10⁴个细胞/cm²；

优选地，所述连续培养使用的培养基为无血清培养基。

5.根据权利要求3所述的美容护肤品，其中，在步骤3)中，所述离心处理的温度为2-8℃；

优选地，所述离心处理的步骤为：先在280-320g离心力下处理8-12min，接着在1900-2100g离心力下处理18-22min。

6.根据权利要求3所述的美容护肤品，其中，在步骤3)中，所述过滤的步骤为：先将所述上清液通过0.20-0.25μm孔径过滤器进行过滤，接着将滤液在500-518kPa和氮气保护下进行第一次超滤，然后加入PBS溶液重复超滤2-4次；

优选地，每次超滤过程中，旋涡高度为液体高度的0.3-0.4。

7.根据权利要求1所述的美容护肤品，其中，所述美容护肤品按照分散体系划分，为溶液、凝胶、悬浮液或乳状液；

优选地，所述美容护肤品按照形状划分，为霜剂、膏状、奶液、干粉、湿粉或喷剂。

8.根据权利要求1所述的美容护肤品，其中，所述美容护肤品为护肤精华液，所述护肤精华液的分散剂为水；所述间充质干细胞分泌的活性因子提取物、水的重量比为0.05ug-5ug：50g-150g。

9.一种如权利要求8所述的护肤精华液的制备方法，其中，所述制备方法包括：

1)将bFGF、水溶性胶原蛋白、VE、海藻糖于水中混合得到混合物W1；

2)将混合物W1过滤并灭菌制得混合物W2，接着将所述间充质干细胞分泌的活性因子提取物与混合物W2混的制得混合物W3；

3)在无菌条件，将无菌的透明质酸与所述混合物W3中混合制得护肤精华液。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其中，在步骤2)中，所述过滤使用的过滤膜的孔径为0.1-0.3μm；

优选地，所述混合满足以下条件：混合温度为0-4℃，混合时间为4-8h；

优选地，所述间充质干细胞分泌的活性因子提取物由溶液的方式提供，溶剂为PBS缓冲溶液。