[发明专利]一种采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法

说明书

本发明涉及一种采用液相色谱‑质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，具体步骤包括卡马西平储备液的配制、校准品溶液的制备、质控品溶液的制备、待测样品的前处理、液相色谱‑质谱实验参数的设置后将处理后的待测血清样本按进样2μL进行液相色谱串联质谱分析，最后计算血清样本中卡马西平浓度。本发明中的标准品溶液和质控品溶液的基质使用动物血清代替人血清，降低了检测成本，且本发明中检测血清中卡马西平浓度的方法，准确、快速、特异性强。

技术领域

本发明涉及一种采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，属于分析化学技术领域。

背景技术

卡马西平(Carbamazepine)是一种高效的广谱抗癫痫药物，能够对多种癫痫如部分性发作、复杂部分性发作、简单部分性发作、继发性全身发作、全身性发作和强直-阵挛发作等症状具有疗效，同时对神经性疼痛、心律失常、预防及治疗躁狂抑郁症都有一定治疗作用。

卡马西平的血药浓度与用药剂量、临床疗效和副作用有直接的关系。卡马西平推荐的血浆浓度5到10微克/毫升。过量服用可能造成剧烈眩晕、嗜睡、呼吸不规则、颤抖，心跳异常、昏迷，严重时有致命的皮肤反应，包括中毒性表皮坏死松解症和史蒂文斯-约翰逊综合征等都在卡马西平治疗中有所报告。所以临床用药时需要对个体随时进行监测给药。

另外，卡马西平的代谢效率随个体的生理情况不同而不同。卡马西平血药浓度的检测结果可以作为个性化治疗方案的制定依据。

治疗药物监测(therapeutic drug monitoring,简称TDM)是指在临床进行药物治疗过程中，观察药物疗效的同时，定时采集患者的血液(有时采集尿液、唾液等液体)，测定其中的药物浓度，探讨药物的体内过程，以便根据患者的具体情况，以药动学和药效学基础理论为指导，借助先进的分析技术手段，并利用药代动力学原理和公式，使给药方案个体化，从而达到满意的疗效及避免发生毒副反应，同时也可以为药物过量中毒的诊断和处理提供有价值的实验室依据，将临床用药从传统的经验模式提高到比较科学的水平。

现有的血药浓度监测试剂盒中的校准品和质控品基质都为同源基质(即人血来源的全血、血清或血浆样本)。但人血的采集在世界范围内都是严格受控的，要经过严格的前期志愿者的招募、体检筛选；要符合伦理要求；要进行血液传染性病毒安全性检测。而且，《中华人民共和国献血法》第十一条规定，“无偿献血的血液必须用于临床，不得买卖。”以上原因造成无论TDM试剂盒生产或实验室自建方法TDM检测，获得国内人源基质都比较困难。而若从国外进口校准品、质控品成品，成本高、周期长，限制了TDM在国内的开展。

发明内容

本发明的目的是为了解决现有马西平血液药物浓度检测过程中校准品和质控品的基质需要采用人源基质造成的检测受限的问题，提出了一种LC-MS法进行卡马西平TDM检测时使用动物血清替代人血清作为基质的检测方法。

本发明采用如下的技术方案：一种采用液相色谱-质谱联用检测卡马西平血液药物浓度的方法，具体步骤包括如下：

(1)卡马西平储备液的制备：取一定量的卡马西平，加甲醇溶解，制备得到卡马西平储备液；

(2)内标工作液：取一定量的D10-卡马西平，加80％甲醇溶解，制备得到内标工作液；

(3)取一定量的动物血清低温解冻，再平衡至室温备用；

(4)校准品溶液的制备：

取步骤(3)的动物血清加入一定量的卡马西平储备液，制备得到一定梯度浓度的多个卡马西平校准品溶液；

(5)质控品溶液的制备：

取步骤(3)的动物血清加入一定量的卡马西平储备液，制备得到一定梯度浓度的多个卡马西平质控品溶液；

(6)待测样品的前处理：