[发明专利]一种有机垃圾热解方法

权利要求书

1.一种有机垃圾热解方法，其特征在于，包括在堆肥进入高温阶段时添加经改造的转基因细菌作为外源菌制剂。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述经改造的转基因细菌包括：

(a)具有SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列；

(b)在(a)中的核苷酸序列经过取代和/或缺失和/或添加一个或多个核苷酸且编码与(a)相同的氨基酸序列的核苷酸序列；

(c)具有与SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列95％以上同源性且能够在宿主细胞中表达并使宿主细胞具有嗜热特性的核苷酸序列。

3.一种表达盒，其特征在于，所述表达盒包括在有效连接的调控序列调控下的权利要求2所述核苷酸序列。

4.一种重组载体，其特征在于，所述重组载体包括权利要求2所述核苷酸序列或权利要求3所述表达盒。

5.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述方法包括构建热泉样品嗜热基因文库，优选地，应用大肠杆菌表达系统构建热泉样品耐高温基因文库。

6.根据权利要求5所述方法，其特征在于，分别在不同环境温度下培养插入外源基因的大肠杆菌，用常见通用引物和古菌特异性引物测序鉴定插入片段长度及具体序列，将所得到的序列去除载体后，获得耐高温相关基因，之后随机插入芽孢杆菌对芽孢杆菌进行基因改造。

7.根据权利要求6所述方法，其特征在于，将重组克隆载体分别用热激方法转化枯草芽孢杆菌感受态细胞，挑取白色菌落，培养后提取质粒，经酶切鉴定后，对阳性克隆进行测序验证，结果表明重组克隆载体中分别对应的插入权利要求2所述核苷酸序列。