[发明专利]一种采用白腐真菌共培养对罗丹明B降解脱色的方法

说明书

本发明公开了一种采用白腐真菌共培养对罗丹明B降解脱色的方法，包括以下步骤：步骤1，菌体培养；分别培养灵芝菌和金针菇菌体；步骤2，脱色培养基共培养；将培养后的灵芝菌和金针菇菌体按1：1比例搭配，转接入脱色培养基中，恒温震荡培养，然后直接用于罗丹明B脱色降解。本发明采用灵芝菌和金针菇共培养的方式，细胞分泌漆酶的化学催化脱色及菌体细胞物理吸附的双重脱色机制，能够对印刷废水特别是罗丹明B进行脱色，方法工艺简单，能够适应高浓度染料环境，耐受性好，脱色效率高，采用生物降解方式，绿色环保，处理效果好。

技术领域

本发明涉及生物环保领域，尤其涉及一种采用白腐真菌共培养对罗丹明B降解脱色的方法。

背景技术

全世界约有100,0000种人工合成染料正被广泛应用于纺织、印染、造纸、化工、皮革、医药及食品等行业，其中仅印染行业消耗的合成染料就达到全球染料的50％以上。虽然合成染料具有化学稳定、色度牢固、酸碱稳定性强等优越的商品特性，但限于整染工艺的低效利用率，每年约有超过10％的残留染料随工业废水排放，导致了严重的环境污染。其中工业应用量较大的偶氮类、蒽醌类、酞菁类、三苯甲烷类等染料不仅色泽鲜艳、结构复杂多样、难以降解，且具有致毒、致畸、致突变等生物危害已有多种化学氧化、物理吸附、光降解等技术相继应用于合成染料的脱色降解，但仍不同程度存在低效、耗时、高成本等不足。如何寻找有效的合成染料脱色、降解方法仍是环境和健康领域面临的重要挑战。

近年来，利用微生物尤其是白腐菌的生长和代谢对合成染料进行脱色、降解，已引起了极大的关注。白腐菌是一类丝状真菌，因附生在树木或木材上，引起木质白色腐烂而得名，能分泌漆酶、木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶等酶系，具有宽泛的底物特异性，可对三苯甲烷类，偶氮类，酞菁类等染料有不同程度的脱色降解。

罗丹明B(RhB)又称玫瑰红B，是一种具有鲜桃红色的人工合成三苯甲烷类染料，广泛应用于纺织印染和化妆品行业。RhB废水色度深、生物毒性大，还具有致癌作用。目前对RhB的处理方法主要有吸附、生物降解和高级氧化等方法。采用现有的单一白腐菌对典型三苯甲烷类染料罗丹明B进行脱色降解处理，发现漆酶活力低，脱色效果不理想。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了一种采用白腐真菌共培养对罗丹明B降解脱色的方法，针对现有技术中的不足，采用灵芝菌和金针菇共培养，配合碳源、氮源和诱导物，解决了现有的单一白腐菌对典型三苯甲烷类染料罗丹明B进行脱色降解处理，存在漆酶活力低，脱色效果不理想的等问题。

为达到上述目的，本发明的技术方案如下：一种采用白腐真菌共培养对罗丹明B降解脱色的方法，包括以下步骤：

步骤1，菌体培养；分别培养灵芝菌和金针菇菌体；

步骤2，脱色培养基共培养；将培养后的灵芝菌和金针菇菌体按1：1比例搭配，转接入脱色培养基中，在30℃、150r/min条件下恒温震荡培养，然后直接用于罗丹明B脱色降解。

通过上述灵芝菌和金针菇共培养方案，灵芝菌和金针菇共培养的漆酶活力显著高于单一白腐菌，且明显高于常规菌种的共培养组合，灵芝菌和金针菇共培养可提高培养基中营养物利用率，降低了产物的反馈抑制，促进漆酶的合成表达量。而共培养组合间的酶活差异源于不同属、种白腐菌间的生长、代谢之间存在协同差异性。通过共培养，可提升微生物的生长性能或代谢强度。

作为本发明的一种优选方案，所述脱色培养基包括碳源、氮源和诱导物。

作为本发明的一种优选方案，所述碳源为果糖；所述氮源为豆饼粉；所述诱导物为ABTS。由于灵芝菌和金针菇共培养过程中对高浓度的染料耐受性仍待强化，因此，采用上述方案对脱色培养基进行改进，以提高脱色效果。