[发明专利]一种含外源镁离子的体外无细胞蛋白合成体系和试剂盒及其应用在审
| 申请号: | 202010269333.X | 申请日: | 2020-04-08 |
| 公开(公告)号: | CN113493801A | 公开(公告)日: | 2021-10-12 |
| 发明(设计)人: | 郭敏;陈绍华;于雪 | 申请(专利权)人: | 康码(上海)生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N15/81 | 分类号: | C12N15/81;C12P21/02 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 201321 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 含外源镁 离子 体外 细胞 蛋白 合成 体系 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种含外源镁离子的体外无细胞蛋白合成体系,其特征在于,所述含外源镁离子的体外无细胞蛋白合成体系,记为CFPS(Mg+)体系,包括以下组分:真核细胞提取物、外源镁离子;所述外源镁离子来自一种或多种供源,至少包括天门冬氨酸镁;所述CFPS(Mg+)体系能够与编码外源蛋白的核酸模板进行体外蛋白合成反应,合成外源蛋白;
所述外源镁离子的供源可选地包括以下任一组分或其组合:葡萄糖酸镁、醋酸镁、谷氨酸镁、氯化镁、磷酸镁、硫酸镁、柠檬酸镁、磷酸氢镁、碘化镁、乳酸镁、硝酸镁、草酸镁。
2.根据权利要求1所述含外源镁离子的体外无细胞蛋白合成体系,其特征在于,所述天门冬氨酸镁选自:L-天门冬氨酸镁、D-天门冬氨酸镁、或其组合;
优选地,在一个天门冬氨酸镁分子中,镁原子与天门冬氨酸残基的数量比为1:1或1:2;
优选方式之一,镁离子源为天门冬氨酸镁、葡萄糖酸镁的组合;
更优选方式之一,镁离子源为L-天门冬氨酸镁、葡萄糖酸镁的组合;
优选方式之一,镁离子源为天门冬氨酸镁、谷氨酸镁的组合;
更优选方式之一,镁离子源为L-天门冬氨酸镁、L-谷氨酸镁的组合;
优选方式之一,镁离子源为天门冬氨酸镁、醋酸镁的组合;
更优选方式之一,镁离子源为L-天门冬氨酸镁、醋酸镁的组合;
优选方式之一,所述外源镁离子的供源包括天门冬氨酸镁,还包括葡萄糖酸镁、谷氨酸镁、醋酸镁中任两种;
更优选方式之一,所述外源镁离子的供源包括L-天门冬氨酸镁,还包括葡萄糖酸镁、L-谷氨酸镁、醋酸镁中任两种;
优选方式之一,镁离子源为天门冬氨酸镁、葡萄糖酸镁、谷氨酸镁的组合;
更优选方式之一,镁离子源为L-天门冬氨酸镁、葡萄糖酸镁、L-谷氨酸镁的混合物;
优选方式之一,所述外源镁离子的供源包括天门冬氨酸镁、葡萄糖酸镁、谷氨酸镁、醋酸镁共四种;
更优选方式之一,所述外源镁离子的供源包括L-天门冬氨酸镁、葡萄糖酸镁、L-谷氨酸镁、醋酸镁共四种。
3.根据权利要求1-2中任一项所述含外源镁离子的体外无细胞蛋白合成体系,其特征在于:所述天门冬氨酸提供的外源镁离子占总的外源镁离子的摩尔百分比,选自下述任一个百分比数值,或者下述任两个百分比数值之间的数值范围:25%、30%、35%、40%、45%、50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、92%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、100%;所述数值范围包括两个端点;
优选地,所述天门冬氨酸为L-天门冬氨酸镁;
进一步优选地,由L-天门冬氨酸镁提供100mol%所述外源镁离子。
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