[发明专利]阻断或者减弱水稻中OsMIR3979的表达以改良水稻籽粒性状的方法有效

专利信息
申请号: 202010265162.3 申请日: 2020-04-07
公开(公告)号: CN113493786B 公开(公告)日: 2023-05-23
发明(设计)人: 张勇;周建平;郑雪莲;全泉;秦鹏程 申请(专利权)人: 电子科技大学
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/82;A01H5/10;A01H6/46
代理公司: 成都泰合道知识产权代理有限公司 51231 代理人: 孙恩源
地址: 611731 四川省成*** 国省代码: 四川;51
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摘要:
搜索关键词: 阻断 或者 减弱 水稻 osmir3979 表达 改良 籽粒 性状 方法
【权利要求书】:

1.一种改良水稻籽粒性状的方法,其特征在于:阻断或者减弱水稻中OsMIR3979的表达,提高水稻籽粒性状;所述的提高水稻籽粒性状为提高水稻籽粒千粒重、粒长或粒宽中的至少一种,所述阻断或者减弱水稻中OsMIR3979的表达是指阻断或者减弱水稻中OsMIR3979-5p段的表达。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述的阻断或者减弱水稻中OsMIR3979的表达通过敲除水稻OsMIR3979编码基因或者干扰OsMIR3979编码基因表达产物的作用进行。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述的干扰OsMIR3979编码基因表达产物作用的方法包括RNA干扰法、CRISPR-Cas13法、靶基因类似物法或短串联靶标类似物法中的至少一种。

4.根据权利要求2所述的方法,其特征在于:所述的敲除水稻基因组中的OsMIR3979编码基因的方法为基因组编辑法、同源重组法或随机插入突变法中的至少一种进行。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于:所述的基因组编辑法包括巨大核酸酶(Meganuclease)法、ZFN法、TALEN法或CRISPR-Cas法中的至少一种。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:当使用CRISPR-Cas法敲除水稻基因组中的OsMIR3979编码基因时,包括以下步骤:

a、设计针对水稻OsMIR3979编码基因的向导RNA;

b、构建可表达该向导RNA的Cas编辑表达载体;

c、用步骤b的得到的表达载体转化水稻,利用CRISPR-Cas基因编辑体系得到转化植株;

d、收集转化植株的种子,筛选出水稻OsMIR3979编码基因定向编辑突变体种子,即得提高籽粒性状的水稻突变体。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:所述的CRISPR-Cas法包括CRISPR-Cas9、CRISPR-Cas12a或CRISPR-Cas12b中的至少一种。

8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于:步骤a中所述的针对水稻OsMIR3979编码基因的向导RNA的核苷酸序列为Seq ID No.2所示。

9.阻断或者减弱水稻中OsMIR3979的表达的试剂在提高水稻籽粒性状中的用途,所述阻断或者减弱水稻中OsMIR3979的表达是指阻断或者减弱水稻中OsMIR3979-5p段的表达,所述的提高水稻籽粒性状为提高水稻籽粒千粒重、粒长或粒宽中的至少一种。

10.根据权利要求9所述的用途,其特征在于:所述阻断或者减弱水稻中OsMIR3979的表达的试剂包括敲除水稻OsMIR3979编码基因的试剂或者干扰OsMIR3979编码基因表达产物的试剂中的至少一种。

11.根据权利要求10所述的用途,其特征在于:所述的干扰OsMIR3979编码基因表达产物的试剂为使用RNA干扰法、CRISPR-Cas13法、靶基因类似物(target mimicry,TM)法或短串联靶标类似物(short tandem target mimic,STTM)法中的至少一种所使用的试剂。

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