[发明专利]靶向CD19和CD22的双特异CAR结构及其应用在审
| 申请号： | 202010260805.5 | 申请日： | 2020-04-03 |
| 公开（公告）号： | CN113493523A | 公开（公告）日： | 2021-10-12 |
| 发明（设计）人： | 陈雪娇;单娟娟;黄霞;徐艳敏;赵文旭;陈军;沈俊杰;张巍;齐亚男;赵永春 | 申请（专利权）人： | 重庆精准生物技术有限公司;重庆精准生物产业技术研究院有限公司 |
| 主分类号： | C07K19/00 | 分类号： | C07K19/00;C12N15/867;C12N5/10;A61K39/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 400000 重庆市九龙坡区*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 靶向 cd19 cd22 特异 car 结构 及其 应用 | ||
1.靶向CD19和CD22双抗原的双特异性嵌合抗原受体，其特征在于，所述双特异性嵌合抗原受体结构为：靶向CD19ScFv(VL-Linker1-VH)-Linker2-靶向CD22ScFv(VH-Linker1-VL)-CD8hinge-8TM-41BB-CD3ζ或靶向CD22ScFv(VH-Linker1-VL)-Linker2-靶向CD19ScFv(VL-Linker1-VH)-CD8hinge-8TM-41BB-CD3ζ。
2.权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，靶向CD19ScFv的氨基酸序列为SEQ IDNO.11，靶向CD22ScFv的氨基酸序列为SEQ ID NO.12。
3.权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，靶向CD19ScFv的核苷酸序列为SEQ IDNO.3，靶向CD22ScFv的核苷酸序列为SEQ ID NO.4。
4.权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述嵌合抗原受体包含如SEQ IDNO.1或SEQ ID NO.2所述的核苷酸序列。
5.权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，所述Linker1的核苷酸序列如SEQ IDNO.10所示，Linker2的核苷酸序列如SEQ ID NO.9所示。
6.权利要求1所述的嵌合抗原受体，其特征在于，连接胞外识别区与跨膜区域的hinge区氨基酸序列如SEQ ID NO.13所示；跨膜区域的氨基酸序列如SEQ ID NO.14所示；胞内共刺激信号域为CD137，氨基酸序列如SEQ ID NO.15所示；胞内信号活化区域为CD3ζ，氨基酸序列如SEQ ID NO.16所示。
7.权利要求1-6所述的嵌合抗原受体，其特征在于，连接胞外识别区与跨膜区域的hinge区核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示；跨膜区域的核苷酸序列如SEQ ID NO.6所示；胞内共刺激信号域为CD137，核苷酸序列如SEQ ID NO.7所示；胞内信号活化区域为CD3ζ，核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。
8.包含权利要求1-6任一项所述的嵌合抗原受体的CAR表达载体，其特征在于，所述表达载体为慢病毒表达载体、逆转录病毒表达载体、腺病毒表达载体、腺相关病毒表达载体、DNA载体，RNA载体、质粒中的任一种。
9.权利要求8所述的CAR表达载体，其特征在于，所述载体包含如SEQ ID NO:1、SEQ IDNO:2任一项所示的核苷酸序列。
10.表达权利要求9所述的嵌合抗原受体的CAR-T细胞。
11.权利要求1所述的CAR结构和/或权利要求8所述的表达载体和/或权利要求10所述的CAR-T细胞在制备治疗肿瘤的药物中的应用。
12.根据权利要求11所述的应用，其特征在于，所述肿瘤共表达CD19和CD22抗原。
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