[发明专利]一种Fe2+

权利要求书

1.一种Fe²⁺和铜蓝蛋白快速检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

第一步、制备银纳米三角溶液，置于4℃条件下避光保存；

第二步、取第一组离心管，分别加入相同体积的银纳米三角溶液，再分别加入不同浓度的Fe²⁺溶液，最后采用醋酸缓冲溶液定容，混匀后反应；

第三步、测量第一组离心管溶液中银纳米三角的LSPR峰位置，得到不同浓度Fe²⁺条件下所对应的银纳米三角LSPR 峰位置的红移值∆λ；

第四步、以lg[Fe²⁺] 为 X 轴， ∆λ为Y轴建立直角坐标系，得到lg[Fe²⁺] 与∆λ之间的线性方程；

第五步、取第二组离心管，分别加入同一浓度的Fe²⁺溶液，再分别加入不同活性的铜蓝蛋白溶液，最后采用醋酸缓冲溶液定容，混匀后水浴孵育；

第六步、取第三组离心管，向该组离心管中分别加入相同体积的银纳米三角溶液和去离子水，然后取水浴后第二组离心管中的溶液分别加入至第三组离心管中，混匀后反应；

第七步、测量第三组离心管溶液中银纳米三角的LSPR峰位置，得到不同活性的铜蓝蛋白条件下所对应的银纳米三角LSPR 峰位置的红移值∆λ′；

第八步、以铜蓝蛋白的活性为X轴，∆λ′为Y轴建立直角坐标系，得到铜蓝蛋白的活性与∆λ′之间的线性方程。

2.根据权利要求1所述一种Fe²⁺和铜蓝蛋白快速检测方法，其特征在于，所述第二步中，第一组离心管中Fe²⁺溶液的终浓度分别为0μM，0.25μM，0.5μM， 1μM， 2μM， 4μM， 8μM，12μM，16μM，24μM，32μM，48μM，64μM，100μM，150μM，200μM，300μM。

3.根据权利要求1所述一种Fe²⁺和铜蓝蛋白快速检测方法，其特征在于，所述第五步中，第二组离心管中铜蓝蛋白溶液的终活性分别为0 U/mL，0.4 U/mL，0.6 U/mL，0.8 U/mL，1.6U/mL，2 U/mL，4 U/mL，8 U/mL，10 U/mL，20 U/mL。

4.根据权利要求1至3任一项所述一种Fe²⁺和铜蓝蛋白快速检测方法的应用，其特征在于，包括以下步骤：

第九步、将人体血清超滤离心后，冰置备用；

第十步、向第二组离心管中分别加入相同体积的超滤血清，重复第五步的操作；

第十一步、重复第六至八步的操作，通过加标算回收率的方法，证实该检测手段的准确性。