[发明专利]一种测定水果中青霉酸含量的方法

说明书

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种测定水果中青霉酸含量的方法。本发明公开了一种测定水果中青霉酸含量的方法，包括步骤：(1)向水果果肉中加入乙酸乙酯和氯化钠，振荡，离心，旋蒸至近干，再用洗耳球吹干，定容，得到定容液；(2)取所述定容液置于装有净化剂的离心管中，涡旋，离心，过滤，得到样品溶液；(3)将所述样品溶液用超高效液相色谱质谱联用方法检测，最终得到水果中青霉酸含量。本发明的方法克服了高效液相色谱法前处理繁琐、检测时间较长的缺点，通过使用超高效液相色谱质谱联用方法，能够高效、准确、灵敏地得到水果中青霉酸的检测结果，操作简单、安全。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种测定水果中青霉酸含量的方法。

背景技术

青霉酸(penicillic acid)分子式为C₈H₁₀O₄，相对分子量为170.16，是一种无色针状结晶化合物，熔点83℃，极易溶于热水、乙醇、乙醚和氯仿，不溶于戊烷、己烷。青霉酸主要是由圆弧青霉菌产生的多聚乙酰类霉菌毒素，是常见的霉菌毒素之一，能抑制动物DNA合成，并能与其他霉菌毒素产生联合毒性。水果在运输贮藏过程中容易受青霉菌的污染而腐烂变坏，因此建立一种新的青霉酸的痕量分析方法，可以快速、准确地测定水果中青霉酸的含量，为水果中青霉酸的污染水平和水果中青霉酸的最大残留限量的设定提供支持。

目前，国内外青霉酸的检测主要使用的方法有薄层层析法、柱前衍生-气相色谱法、柱前衍生-高效液相色谱法。薄层层析法难以应用于食品中痕量青霉酸的检测。青霉酸极性较大，沸点较高，无法直接进气相色谱分析，需要进行硅烷化衍生，操作非常繁琐。青霉酸的紫外吸收较弱，应用高效液相色谱法检测青霉酸可先进行柱前衍生反应，提高检测灵敏度，但样品前处理繁琐，若应用高效液相色谱直接进行检测，检测时间长，灵敏度不高。

发明内容

针对本领域研究方面之不足，本发明的目的提供一种测定水果中青霉酸的方法，为水果中青霉酸含量的测定提供更高效、准确、灵敏的分析方法。

实现本发明目的的具体技术方案为：

一种测定水果中青霉酸含量的方法，其包括步骤：

(1)向水果果肉中加入乙酸乙酯和氯化钠，放置在摇床上振荡30min，离心5min，取离心后的上清液于旋转蒸发仪中旋蒸至近干，再用洗耳球吹干，之后用色谱纯乙腈定容，得到定容液；

其中，所述水果果肉与乙酸乙酯的固液比为1:1；所述氯化钠与水果果肉的质量比为3:10；所述色谱纯乙腈与所述离心后的上清液的体积比为1:5；

(2)取所述定容液置于装有净化剂的离心管中，涡旋30s，离心1min，取上清液过0.22μm有机系滤膜于进样小瓶中，得到样品溶液；

其中，所述净化剂与定容液的固液比为0.08:1；

(3)将所述样品溶液用超高效液相色谱质谱联用方法检测，与标准曲线比较，最终得到水果中青霉酸含量。

优选地，所述水果为桃子、苹果、柑橘、猕猴桃、葡萄中的一种。

优选地，所述步骤(1)中称取水果果肉为10g(+0.02g)，乙酸乙酯的加入量为10mL，氯化钠的加入量为3g。

优选地，所述步骤(1)中上清液体积为7.5mL，色谱纯乙腈体积为1.5mL；用乙酸乙酯提取后的上清液没有固体杂质，可以直接旋蒸。

优选地，所述步骤(1)中，所用仪器的条件为：

摇床条件：时间30min，温度25℃，转速200rpm；

离心机条件：时间5min，温度0℃，转速3800rpm；

旋转蒸发仪条件：转速20～280rpm，水浴温度为室温。