[发明专利]一种降解CREPT多肽抑制剂及其在抑制胰腺癌细胞增殖与肿瘤发生过程中的应用

说明书

本发明公开了一种降解CREPT多肽抑制剂及其在抑制胰腺癌细胞增殖与肿瘤发生过程中的应用。本发明提供的降解CREPT多肽抑制剂PRTC包括靶向模块TA、降解模块DA、连接体和跨膜肽；所述靶向模块TA的氨基酸序列为CREPT蛋白氨基酸序列的第266‑286位所示的蛋白质；所述降解模块DA的氨基酸序列为序列3所示的蛋白质；所述连接体为6‑氨基己酸；所述跨膜肽的氨基酸序列为序列4所示的蛋白质。本发明利用靶向蛋白降解嵌合体技术，设计并制备得到可通过蛋白酶体途径降解CREPT蛋白质的PRTC。通过实验证明：PRTC可以抑制胰腺癌细胞增殖和迁移的能力，降低其成瘤能力，为胰腺癌的治疗提供了新的思路。

技术领域

本发明涉及分子靶向药物领域，具体涉及靶向降解CREPT蛋白的多肽抑制剂设计及其应用，特别涉及靶向降解CREPT蛋白的多肽抑制剂设计及其在抑制胰腺癌细胞增殖与肿瘤发生过程中的应用。

背景技术

癌症是致死率最高的疾病之一，严重危害人类健康。包括化疗和放疗在内的传统的治疗手段会产生一系列的副作用，因为它们不仅会杀伤癌细胞还会危害癌旁的正常细胞。为了解决这个问题，近些年兴起了可以针对特定通路的分子靶向治疗，其是精准医疗的基础。

2001年，靶向蛋白降解嵌合体(PROTACs)技术开始引起人们关注，它综合了现有的多种传统靶向治疗癌症手段的优点。PROTAC技术不仅具备细胞渗透性和靶向降解蛋白的能力，还能克服细胞产生耐药性的问题。PROTAC分子由靶向模块、降解模块和连接体三部分组成。现有的PROTAC分子分为多肽PROTAC和小分子PROTAC。靶向模块可以利用小分子或者多肽分子特异性的识别细胞内特异的蛋白，一旦靶向模块结合靶标，降解模块可以将靶蛋白拉到E3泛素连接酶上并通过蛋白酶体途径将其降解。这项技术能够选择性的降解细胞内蛋白而非仅仅抑制靶蛋白的活性。目前，PROTAC技术可以在胞内靶向包括核受体、蛋白激酶等一系列的癌蛋白。

CREPT(RPRD1B)是本专利申请人最先克隆的癌基因。研究表明CREPT在促进细胞增殖和肿瘤生成方面发挥重要作用。免疫组化结果发现，相较于癌旁组织，CREPT在多种癌组织中呈高表达水平。机制上，CREPT不仅可以调控细胞周期，其还在DNA损伤修复中发挥重要作用。

发明内容

本发明的第一个目的是提供一种靶向CREPT的蛋白降解嵌合体(PROTAC)。

本发明提供的靶向CREPT的蛋白降解嵌合体包括降解模块、靶向模块和用于连接所述靶向模块和所述降解模块的连接体；

所述靶向模块的氨基酸序列为CREPT蛋白氨基酸序列(序列1)的第266-286位所示的蛋白质。

进一步的，所述靶向模块的氨基酸序列具体为序列2所示的蛋白质(KDVLSEKEKKLEEYKQKLARV)，是与目标蛋白CREPT结合的配体。

所述降解模块的氨基酸序列为序列3所示的蛋白质(IYP(OH)AL)，是与E3连接酶结合的配体。其中，P(OH)表示羟基脯氨酸。

所述连接体具体为6-氨基己酸(AHX)。

更进一步的，所述蛋白降解嵌合体还包括用于增加细胞渗透性的跨膜肽，依次由所述降解模块、所述连接体、所述靶向模块和跨膜肽组成。

所述跨膜肽的氨基酸序列具体为序列4所示的蛋白质(RRRRK)。

本发明的靶向CREPT的蛋白降解嵌合体为多肽PROTAC，其结构式具体如下：IYP(OH)AL-AHX-KDVLSEKEKKLEEYKQKLARV-RRRRK。该蛋白降解嵌合体可自行合成，也可委托相关公司或单位合成。在本发明的一个具体实施例中，所述靶向CREPT的蛋白降解嵌合体是委托上海强耀生物科技有限公司合成的。