[发明专利]一种胎牛血清的提取方法

权利要求书

1.一种胎牛血清的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

S1：血清提取，准备一只刚刚出生的小牛，不要进行喂食直接抽取血液，将提取的血液盛放在玻璃瓶中进行保持；

S2：冷藏储存，准备一个可以控温的储藏箱，将玻璃瓶存放在储存箱中，将储存箱中的温度控制在-5℃至-20℃的范围内；

S3：过滤，将生血清在受控条件下解冻，并通过无菌过滤，最后过滤步骤使用多个0.1um过滤器，填料在层流罩内进行，层流罩经认证可维持100级条件，灌装室用高效空气过滤器过滤空气保持正压。血清被无菌地分配到伽玛射线照射的无菌PETG或PETE瓶中，装满的容器立即贴上标签并冷冻，然后保持在-5℃以下的温度以保持产品质量；

S4：离心，将过滤后血清在-5℃以下的温度进行离心后静置，经过沉淀后得到需要的血清，离心的过程注意控制温度，防止温度波动过大，影响血清的离心，从血块中小心地取出血清，以避免被红细胞污染；

S5：质量测试，通过化学分析、微生物检测和病毒检测对血清进行测试；

S6储存和运输，FBS采用伽玛辐照、无菌PETG或PETE瓶供应。将血清冷冻保存在-5℃至-20℃的温度下，应避免血清多次冻融循环，导致产品变质，使用较小的包装尺寸或将血清分为适合一次性使用的小份，在将血清和等分物放入无菌容器时，务必使用无菌技术。

2.根据权利要求1所述的一种胎牛血清的提取方法，其特征在于，所述S1中，需要对血液提取装置和玻璃瓶进行消毒才能使用。

3.根据权利要求1所述的一种胎牛血清的提取方法，其特征在于，所述S5中，化学分析是使用渗透压(蒸汽压法)和pH值是在仪器上测量的，用分光光度法测定血清血红蛋白含量；内毒素含量用鲎试剂凝胶凝固法测定。

4.根据权利要求1所述的一种胎牛血清的提取方法，其特征在于，所述S5中，微生物检测对每批血清进行检测，以确定使用的方法在检测限内没有支原体污染，采用大体积重晶石法和核仁法检测培养基中可培养的支原体，将三种不同的培养基接种于血清样本，在好氧和厌氧条件下培养，非可培养支原体通过将样本传至指示细胞系并用DNA荧光染色法染色来检测。

5.根据权利要求1所述的一种胎牛血清的提取方法，其特征在于，所述S5中，病毒检测先前证明无病毒污染的病毒敏感细胞培养物在含有试验血清的培养基中培养，在此期间，对培养物进行显微镜检查，以确定病毒引起的形态变化或细胞病变的证据，多次传代至少21天后，用荧光抗体染色法检测培养物中是否存在特定的病毒制剂用荧光抗体染色法检测是否存在细胞病变病毒制剂，如感染性牛腹泻病毒、蓝舌病毒和牛腺病毒。