[发明专利]猪口蹄疫病毒和猪轮状病毒的融合蛋白、类病毒颗粒和疫苗及制备方法

说明书

本发明涉及分子生物学领域，具体而言，提供了一种猪口蹄疫病毒和猪轮状病毒的融合蛋白、类病毒颗粒和疫苗及制备方法。本发明提供的融合蛋白包括猪口蹄疫病毒的抗原表位和猪轮状病毒的VP6蛋白，且该融合蛋白能够自行装配成类病毒颗粒。本发明以猪轮状病毒的VP6蛋白为载体，嵌合上猪口蹄疫病毒的抗原表位后获得融合蛋白，该融合蛋白可以自行装配成类病毒颗粒，使猪口蹄疫病毒的抗原表位能够展示到该类病毒颗粒的表面，得到的类病毒颗粒对猪口蹄疫病毒和猪轮状病毒均具有很好的免疫原性。由该类病毒颗粒制备得到的疫苗为二联疫苗，使得动物同时获得猪口蹄疫病毒和猪轮状病毒的免疫原性，免疫效果好。

技术领域

本发明涉及分子生物学领域，具体而言，涉及一种猪口蹄疫病毒和猪轮状病毒的融合蛋白、类病毒颗粒和疫苗及制备方法。

背景技术

口蹄疫(foot-and-mouth disease，FMD)，是由口蹄疫病毒所引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传染病。主要侵害偶蹄兽，常见的如猪、牛、羊等，偶见于人和其他动物。其临诊特征为口腔粘膜、蹄部和乳房皮肤发生水疱。该病传播途径多、速度快，曾多次在世界范围内暴发流行，造成巨大政治、经济损失。鉴于此，世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类传染病之首。目前，有三分之二的OIE成员国流行FMD，时刻威胁着无FMD国家和地区的家畜安全和畜产品贸易。

猪轮状病毒病是由轮状病毒感染引起的一种以腹泻为特征的传染性人畜共患病，轮状病毒(Rotavirus，RV)在猪群中广泛存在，有明显的季节流行性，多发于7-14日龄的仔猪，发病率约50％-80％，死亡率约15％，临床上以萎顿、厌食、呕吐、腹泻和脱水、体重减轻为特征。轮状病毒病呈世界性分布并极难净化，引起严重经济损失。

目前市场上口蹄疫疫苗以O/A二价灭活疫苗和O/A二价合成肽疫苗为主，轮状病毒则无商品化的疫苗。其中，在各种预防口蹄疫的疫苗中，用基因工程技术制备亚单位疫苗是近几十年较为成功的方向，类病毒颗粒疫苗(VLP)则是亚单位疫苗中免疫原性最强、效果最突出、具有广阔应用前景的基因工程疫苗。虽然制备口蹄疫类病毒颗粒有多条技术路线，然而口蹄疫病毒颗粒较差的热稳定性和酸稳定性限制了口蹄疫VLP疫苗在放大和生产等方面的应用。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一目的在于提供一种猪口蹄疫病毒和猪轮状病毒的融合蛋白及其制备方法和其相关生物材料。

本发明的第二目的在于提供融合蛋白或生物材料的应用。

本发明的第三目的在于提供一种猪口蹄疫病毒和猪轮状病毒的类病毒颗粒及其制备方法。

本发明的第四目的在于提供一种抗猪口蹄疫和猪轮状病毒病的类病毒颗粒疫苗。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种猪口蹄疫病毒和猪轮状病毒的融合蛋白，其包括猪口蹄疫病毒的抗原表位和猪轮状病毒的VP6蛋白，且所述融合蛋白能够自行装配成类病毒颗粒。

进一步地，所述抗原表位包括VP1蛋白抗原表位129-166aa和VP1蛋白抗原表位196-213aa；

优选地，所述抗原表位选自O型口蹄疫病毒的VP1蛋白抗原表位129-166aa和O型口蹄疫病毒的VP1蛋白抗原表位196-213aa；

所述O型口蹄疫病毒的VP1蛋白抗原表位129-166aa的氨基酸序列为SEQ ID NO.1，所述O型口蹄疫病毒的VP1蛋白抗原表位196-213aa的氨基酸序列为SEQ ID NO.2；

优选地，所述VP6蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.3；

优选地，所述VP6蛋白的核苷酸序列为SEQ ID NO.4；

优选地，所述融合蛋白的氨基酸序列为SEQ ID NO.5；