[发明专利]可溶性PD-L2作为SLE生物标志物的应用

说明书

本发明公开了可溶性PD‑L2作为SLE生物标志物的应用，具体公开了可溶性PD‑L2作为SLE生物标志物在制备SLE诊疗评估试剂中的应用，所述诊疗评估试剂的检测样本为血清。同时公开了一种试剂组在制备SLE诊疗评估试剂中的应用，所述的试剂组包括可溶性PD‑L2检测试剂和补体C3、C4检测试剂，可溶性PD‑L2水平与补体C3、C4水平呈正相关。采用本发明的检测试剂盒对血清样本中可溶性PD‑L2以及补体C3、C4联合检测，可有效用于SLE疾病的早期诊断、预后评估，为SLE疾病的诊疗提供了一种新的途径，具有良好的临床应用前景。

技术领域

本发明属于生物检测技术领域，具体涉及可溶性PD-L2(sPD-L2)作为SLE生物标志物的应用。

背景技术

SLE是一种风湿性自身免疫性疾病，临床表现可累及全身各个器官、组织，为全身性、弥漫性疾病。SLE好发于年轻女性，常为20-40岁的育龄期女性。在SLE发病机制中，自身免疫耐受损害、淋巴细胞过度活化所导致的自身抗体的产生和炎症细胞浸润是其主要的病理损伤机制。在SLE的免疫病理过程中，B7/CD28家族分子信号通路发挥着重要作用，其不仅可通过提供正性共刺激信号来启动、增强、维持T、B淋巴细胞介导的免疫应答，还可以通过提供负性共刺激信号来限制、减弱或者终止免疫反应。

PD-1/PD-L信号通路作为负性调节因子在维持T细胞免疫应答耐受中有很重要作用。有研究报道发现PD-1缺乏的C57BL/6小鼠出现狼疮样自身免疫性增生性关节炎和肾小球肾炎，并伴有肾小球上IgG3和C3补体的沉积。PD-L2作为PD-1的受体之一，仅表达于活化的单核巨噬细胞及专职的抗原递逞细胞中如树突状细胞，有关PD-L2在自身免疫病特别是在SLE中的病理机制研究甚少。前期我们通过流式细胞术分析发现SLE患者外周血单核细胞上PD-L2分子相对于健康人群显著高表达，正同其它研究者报道PD-1和/或PD-1配体在其他人类自身免疫性疾病中的表达也有所增加。Kobayashi等发现干燥综合征患者唾液淋巴细胞PD-1和唾液腺导管及腺泡上皮细胞PD-L1表达增强。同时Liu等报道PD-1及PD-L1分别在SLE患者CD3+T细胞及CD14+单核细胞上高表达，这可能是T细胞过度活化后的免疫调控，也有可能是与其它受体(并非PD-1)相结合传递正向刺激信号。

多种共刺激分子能分别以细胞膜型和可溶型两种形式存在，包括CD28、CTLA-4、CD80、CD86、ICOSL、B7-H3和B7-H4等。可溶性形式可以通过蛋白水解酶裂解细胞上的膜型分子从而脱落形成，也可由专一的mRNA直接编码产生。可溶性的共刺激分子在免疫调节网络中具有十分重要的作用，有些可溶性共刺激分子如sCTLA-4可干扰CD80/CD86与膜型CTLA-4的结合，阻断CTLA-4的抑制性作用，可有助有活化T细胞，上调免疫应答，因此在多种自身免疫性疾病中sCTLA-4已被发现高表达；而有些可溶性共刺激分子的功能如同其膜型分子相一致可激活相应的配体或受体，如soluble ICOS可以激活配体B7h，具有上调免疫应答的功能。可溶性共刺激分子在疾病的早期诊断及病情监测中有重要作用。有研究报道共刺激分子的可溶性形式在SLE患者血清中分泌发生改变，如可溶性CD28分泌上升，ICOSL分泌下降，sPD-L1分泌水平上调。

SLE临床表现复杂多样，病情反复多变，早期诊断困难，因此迫切需要寻求一种新型、特异性及敏感性较高的生物标志物用于SLE的诊断和预后评估。现有技术公开了外周血单核细胞上PD-L2分子在SLE患者中表达水平的变化，但并未证明sPD-L2是否能作为有效的生物标志物用于SLE疾病早期诊断的指标及疾病治疗的靶点。目前尚未见以血清sPD-L2水平作为SLE疾病生物标志物的相关报道。

发明内容

本发明的目的在于研究sPD-L2在SLE患者中的异常表达情况及其可能的临床意义，本研究收集SLE患者外周血血清，分析sPD-L2的表达情况及与临床病例资料、各项检验参数间的相关性，探讨sPD-L2是否能成为SLE疾病早期诊断的指标及疾病监测治疗的靶点。

为了实现上述目的，本发明提供以下技术方案：