[发明专利]一种凝胶粒径分布检测方法

说明书

本发明提供一种凝胶粒径分布检测方法，其主要检测流程包括检测样品预处理、凝胶染色处理、凝胶分色处理、终处理、显微镜检测和数据统计分析,本检测方法成本低廉、操作简单，检测便捷、准确度高且可对凝胶颗粒形状进行观察记录。

技术领域

本发明属于凝胶粒径检测领域，具体涉及一种整形手术用交联透明质酸钠凝胶粒径分布检测方法。

背景技术

整形手术用交联透明质酸钠凝胶主要成分为交联透明质酸钠和游离透明质酸钠。透明质酸钠是一种由D-葡萄糖醛酸和N-乙酰基-D-葡萄糖胺通过β-（1-3）糖苷键连接而成的双糖重复结构单元组成的线性多糖。每个双糖单元通过β-（1-4）糖苷键与另个一双糖单元连接起来。透明质酸钠在交联剂作用下，经交联后得到交联透明质酸钠凝胶。交联透明质酸成透明块状固态凝胶，而游离透明质酸钠为高粘度液体，所以整形手术用交联透明质酸钠凝胶粒径检测主要是针对交联透明质酸钠凝胶颗粒。凝胶粒径的大小分布直接影响产品体内降解效果、注射时推挤力及产品均一性，故此凝胶粒径大小属于整形手术用交联透明质酸钠凝胶的重要技术参数，其检测方法的选用直接关系到凝胶颗粒粒径检测的准确性。

现有整形手术用交联透明质酸钠凝胶粒径分布检测方法主要是按照《中华人民共和国药典（四部）》（2015年版）0982粒度与粒度分布法 第三法（光散射法）湿法测定。光散射法湿法测定需待检样品在检测过程中均匀分散在液相中，但对如何保持待检颗粒在液相中均匀分散未做说明。交联透明质酸钠凝胶不同处理方法会导致其在液相中的沉降度，且光散射法检测专业性高，检测费用较高。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供一种凝胶粒径分布检测方法，本检测方法成本低廉、操作简单，检测便捷、准确度高且可对凝胶颗粒形状进行观察记录。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：

提供一种凝胶粒径分布检测方法,其特征在于，包括以下步骤：

1）样品预处理:取凝胶样品，加入10-20倍量的PBS溶液中进行振荡清洗，每次清洗5-20min，共清洗5-10次，获得预处理后样品；

2）取预处理后样品，加入到离心管中，加入染色剂进行染色处理；采用70%-95%乙醇进行分色处理；采用5%-10%甘油进行终处理，获得终处理后样品；

3) 显微检测：取终处理后样品，使用显微镜进行数据检测，以凝胶长轴的轴向长度测量值作为不规则颗粒粒径；

4）数据统计：将测量数据进行统计、建立数据正态分布图、根据正态分布图进行凝胶粒径分布计算。

优选地，所述染色剂选自甲苯胺蓝染色剂，所述甲苯胺蓝染色剂中甲苯胺蓝的质量分数为：0.1%-1%。

优选地，步骤2）中，加入染色剂进行染色处理后，需进行分色处理。

优选地，所述预处理后样品经过染色处理后，需加PBS溶液，振荡30-60s，静置5-10min，弃上清液后，再进行分色处理。

优选地，所述分色处理具体过程为：加入70%-95%乙醇，振荡30-60s， 800-1500rpm离心5-10min，弃上清液。

优选地，采用5%-10%甘油进行终处理的具体过程为：加入5%-10%甘油，振荡30-60s，800-1500rpm离心5-10min，弃上清液，再加入5%-10%甘油，振荡30-60s，获得终处理后样品。

优选地，所述凝胶选自交联透明质酸钠凝胶。

现对于现有技术，本发明的有益效果在于：