[发明专利]用于检测同种异体的、或供者特异性的非HLA抗体的方法

权利要求书

1.用于检测同种异体的、或供者特异性的非HLA抗体的方法，包括以下步骤：

1)从用于检测的原材料中提取含有HLA类抗原和非HLA类抗原的组合抗原；

2)采用HLA类抗原特异性的抗体或抗体组合，清除组合抗原中的HLA类抗原，得到非HLA类抗原；

3)固定非HLA类抗原，通过抗原抗体结合反应，检测被检样本中的非HLA抗体。

2.根据权利要求1所述的用于检测同种异体的、或供者特异性的非HLA抗体的方法，其特征在于，步骤1)中，用于检测的原材料的来源包括：移植物供者或潜在供者来源的器官、组织、细胞或其组分，或所述细胞经体外分离、培养、扩增后的细胞。

3.根据权利要求2所述的用于检测同种异体的、或供者特异性的非HLA抗体的方法，其特征在于，所述组织包括上皮、结缔、肌肉、神经组织，所述细胞或其组分包括上述各类组织的组成细胞或其细分类型组分。

4.根据权利要求1所述的用于检测同种异体的、或供者特异性的非HLA抗体的方法，其特征在于，步骤1)中，含有HLA类抗原和非HLA类抗原的组合抗原包括细胞膜表面抗原，细胞裂解液或其组分中的抗原，所述细胞裂解液的组分包括膜组分、胞浆组分、细胞核组分。

5.根据权利要求1所述的用于检测同种异体的、或供者特异性的非HLA抗体的方法，其特征在于，步骤2)中，HLA类抗原特异性的抗体或抗体组合包括：单克隆或多克隆的针对HLA-I类、或/和II类抗原特异性的完整抗体或其Fab′或F(ab′)₂片段，和所有HLA类抗原具有全反应性的HLA抗体、抗体片段、或其组合。

6.根据权利要求1所述的用于检测同种异体的、或供者特异性的非HLA抗体的方法，其特征在于，步骤2)还包括对HLA类抗原清除作用有效性的验证：取部分清除反应后的产物包被固定非HLA类抗原用介质，通过清除HLA类抗原时所用抗体或其他HLA特异性抗体验证其是否被清除彻底，如发现HLA类抗原未完全清除干净，则重复清除过程，直至完全清除。

7.根据权利要求1所述的用于检测同种异体的、或供者特异性的非HLA抗体的方法，其特征在于，步骤3)中，通过检测平台固定非HLA类抗原，所述检测平台包括：酶联免疫吸附实验、固相膜、蛋白芯片、流式微球、luminex液相芯片微球。

8.根据权利要求1所述的用于检测同种异体的、或供者特异性的非HLA抗体的方法，其特征在于，步骤3)中，所述被检样本包括被检对象的体液，组织灌洗液，组织或细胞表面的洗脱液。

9.根据权利要求1所述的用于检测同种异体的、或供者特异性的非HLA抗体的方法，其特征在于，步骤3)中，和被固定的非HLA类抗原结合的抗体包括IgG、IgM或其他类型的抗体或其亚型。

10.根据权利要求1所述的用于检测同种异体的、或供者特异性的非HLA抗体的方法，其特征在于，步骤3)中，检测时采用的二抗包括针对样本种群来源的特异性抗体类型或其亚型的单抗或多抗，识别多种或所有抗体类型的单反应性、多反应性、或全反应性的二抗。